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NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒
NEBNext® Ultra™ II DNA Library Prep Kit for Illumina®
Ultra II DNA 文库制备试剂盒能够用更低起始量的 DNA 构建高质量的文库。文库制备每一个步骤中的试剂都经过优化，能够从 500 pg 至 1 μg 的起始 DNA 高效构建高质量的文库。新一代 NEBNext 试剂采用快速、精简、自动化的实验流程，在降低 PCR 循环数的同时提高了 GC 覆盖度。本试剂盒与 PCR-free 实验流程兼容，且对于难以建库的样本，如 FFPE 样本，也有很好的效果。
优势：
1、更高的文库产量，满足更多实验所需
2、即使是起始量极低的 DNA 样本，依然可以制备高质量文库，最低起始量可低至 500 pg
3、各种类型的 DNA 样本均可制备文库，包括高 GC 含量的靶标 和 FFPE DNA 样本
4、提高靶向富集应用的产量和质量
5、流程化的操作设计、减少手动操作时间，与自动化兼容，试剂盒或模块提供了选择的便利
图1：NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒对于不同起始量 DNA 均可实现最高的文库产量和转化率
A：以人 NA19240 基因组 DNA 为样本制备文库，起始量和 PCR 循环数如图所示。文库制备按照生产商推荐的方法进行，但省略了片段筛选步骤。
B：以人 NA19240 基因组 DNA 为样本制备文库，起始量和制备试剂盒如图所示，文库制备按照生产商推荐方法进行，不进行扩增步骤。接头连接的分子用 qPCR 进行定量，定量的结果以 Ultra II 的转化率为基准进行标准化处理。对于不同起始量 DNA，Ultra II 试剂盒均能得到最高的接头连接分子转化率。
图2：对于不同 GC 含量和起始量的微生物基因组 DNA，NEBNext Ultra II 文库制备试剂盒能获得均一的 GC 覆盖度
以 500 pg、1 ng 和 100 ng 基因组 DNA 为起始样本，使用 Ultra II DNA 文库制备试剂盒进行建库后，通过 Illumina MiSeq® 测序。使用 Bowtie 2.2.4 将 reads 进行比对，并使用 Picard's CollectGCBiasMetrics（v1.117）计算 GC 覆盖度。预期的标准化覆盖度（1.0）以灰色水平线表示，不同 GC% 中 100 bp 区域的数量以灰色条形图显示，不同颜色折线图表示标准化后的文库覆盖度。
图3：NEBNext Ultra II 可在 PCR-free 实验流程中实现卓越的产量
以 100 ng 人 NA19240 基因组 DNA 为样本制备文库，文库制备试剂盒如图所示，文库制备按照生产商推荐方法进行，不进行扩增步骤。使用 NEBNext 文库定量试剂盒（Illumina）通过 qPCR 测定文库产量。NEBNext Ultra II 文库制备试剂盒的产量最高。
贮存条件：建议贮存于 -20℃。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| 744970.5 | NucleoMag NGS 核酸纯化以及片段筛选磁珠 | 5ml | 商城订购 |
| E7335L | NEBNext 多样本接头引物试剂盒 - Illumina（检索引物试剂盒 1） | 96 rxns | 商城订购 |
| M0348S | NEBNext DNA 双链片段化酶 | 50 rxns | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| E7645S | NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 | 24 rxns | 商城订购 |
| E7645L | NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 | 96 rxns | 商城订购 |
