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虾碱性磷酸酶（rSAP）
Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP)
虾碱性磷酸酶（rSAP）是一种不耐热的碱性磷酸酶，重组表达后纯化得到。rSAP 与野生型酶相同，不含亲和标签或其它修饰。rSAP 可以非特异性催化 DNA 和 RNA 的 5´ 和 3´ 末端磷酸单酯的去磷酸化。另外，rSAP 还水解核糖核苷酸和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。rSAP 在许多分子生物学应用中有着重要作用，例如去除 DNA 和 RNA 的磷酸化末端用于后续的克隆或探针末端标记。
在克隆中，对线性化质粒 DNA 去磷酸化，可防止自连。该酶作用于 5´ 突出端、5´ 凹陷端和平末端。rSAP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备 DNA 测序和 SNP 分析模板。rSAP 在65℃ 下加热 5 分钟即可完全且不可逆地失活，因此无需在连接或末端标记前去除 rSAP。
产品特点：
1、快速且不可逆的热灭活消除了不需要的活性
2、与天然酶相比，改善了储存稳定性
3、更快的反应设置（不需要补充添加剂，如锌）
4、灵活的反应条件（在任何限制性内切酶缓冲液中都活跃，无需清洁）
5、所需酶量更少（高比活性），从而降低了每个反应的成本
6、无需多种磷酸酶（rSAP可以去除DNA、RNA和dNTPs的5'-和3'-磷酸基团）
7、活跃在未掺入的dNTPs的PCR产物上 - 提高了DNA测序和SNP分析的质量
8、重组来源，保证了纯度、一致性和价值
图 1：rSAP 在 65℃ 下热失活
在推荐反应条件下温育 1 单位的 rSAP（包括 DNA）30 分钟，然后在 65℃ 下加热。采用 PNPP 检测法测定剩余的磷酸酶活性。
1、单位定义
1 单位指在 1 ml 总反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟水解 1 μmol 对硝基苯磷酸盐（PNPP）（NEB #P0757）所需的酶量。
2、反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37°C
3、1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25°C)
4、贮存溶液
25 mM Tris-HCl
1 mM MgCl2
50% Glycerol
pH 7.5 @ 25°C
5、热失活：65°C for 5 minutes
6、分子量
理论上的: 54 kDa
7、单位活性检测条件
1 M 二乙醇胺-HCl（pH 9.8）、0.5 mM MgCl2、50 mM 对硝基苯磷酸盐。这些条件仅用于定量酶活性。
8、注意事项
（1）与大多数碱性磷酸酶一样，rSAP 是一种 Zn2+ 和 Mg2+ 依赖型酶。在我们的制剂中，锌离子被紧密结合在活性中心，因此无需补充锌离子或其它添加剂。
（2）rSAP 在 1X NEBuffer 1.1、2.1、3.1 以及 NEBuffer 1、2、3、4 和用于 EcoRI 的 NEBuffer 中均有活性。
（3）添加一价盐后 rSAP 的活性提高。
（4）金属螯合剂（如 EDTA）、无机磷酸盐和磷酸盐类似物会抑制 rSAP。
（5）添加还原剂（DTT、β-ME）后 rSAP 的活性降低。
（6）分子量：rSAP 是同源二聚体。单体分子量为 54 kDa。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| 243-MCT-C-2.0 | 2.0ml微量离心管 | 500 个/盒，10 盒/箱 | 商城订购 |
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| M0371L | 虾碱性磷酸酶（rSAP） | 2,500 units | 商城订购 |
| M0371S | 虾碱性磷酸酶（rSAP） | 500 units | 商城订购 |
| M0371V | 虾碱性磷酸酶（rSAP） | 250 units | 商城订购 |
