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高保真限制性内切酶EcoRI-HF®
EcoRI-HF®
高保真(HF®)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart™ 缓冲液)。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较,虽然价格相同,但性能和性价比更高:
1、为提高性能进行基因工程改造
2、在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性
3、符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
4、降低星号活性
5、随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
6、限制性内切酶酶切位点:G/AATTC
1、单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。
2、反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37°C
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25°C)
3、在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 10%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: <10%
rCutSmart™ Buffer: 100%
4、稀释兼容性:稀释液 C
5、贮存溶液
10 mM KPO4
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
0.15% Triton® X-100
pH 7 @ 25°C
6、热失活
65°C for 20 minutes
7、甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
8、同裂酶:EcoRI
9、贮存条件
建议将试剂盒贮存于 -20℃。
10、注意事项
EcoRI-HF® 与 EcoRI(NEB #R0101)具有相同的特异性,但经过改造后星号活性显著降低。
货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒,10盒/组,5组/箱 | 商城订购 |
货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
R3101S | 高保真限制性内切酶EcoRI-HF® | 10,000 units | 商城订购 |
R3101V | 高保真限制性内切酶EcoRI-HF® | 5,000 units | 商城订购 |
R3101L | 高保真限制性内切酶EcoRI-HF® | 50,000 units | 商城订购 |
R3101T | 高保真限制性内切酶EcoRI-HF® | 高浓度5X,10,000 units | 商城订购 |
R3101M | 高保真限制性内切酶EcoRI-HF® | 高浓度5X,50,000 units | 商城订购 |