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Taq DNA 连接酶
Taq DNA Ligase
Taq DNA 连接酶是一款耐热连接酶，能够催化两条相邻 DNA 链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，并且两条寡核苷酸链之间没有缺口的条件下才可发生。因此，可以用它来检测单核苷酸变异。Taq DNA 连接酶以 NAD 为辅因子。在 37-75℃ 范围内，Taq DNA 连接酶均有活性。
产品特点：
1、分离自重组来源
2、用于在 PCR 和连接酶链式反应中加入磷酸化寡核苷酸的热稳定连接酶
3、Taq DNA 连接酶不能替代 T4 DNA 连接酶
4、随附含 NAD+ 的 10X 反应缓冲液
1、单位定义（粘性末端单位）
1 单位是指在 45℃ 条件下，当总反应体积为 50 µl 时，15 分钟能连接 50% 的 1 µg BstEII 酶切 λ DNA 的 12 碱基对粘性末端所需的酶量。
2、反应条件
1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液
Incubate at 45°C
3、1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液
20 mM Tris-HCl
25 mM Potassium Acetate
10 mM Magnesium Acetate
1 mM NAD 1
10 mM DTT
0.1% Triton® X-100
(pH 7.3 @ 25°C)
4、使用浓度
40,000 units/ml
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C
5、热失活：否
6、单位活性检测条件
1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液和 DNA（20 µg/ml）。在 45℃ 下温育 15 分钟后，通过添加停止酶促反应的染料（50% 甘油，50 mM EDTA 和溴酚蓝）来终止反应，在 70℃ 下加热 10 分钟，然后上样到 0.7% 的琼脂糖凝胶上。由于存在连接酶，BstEII 酶切 λ DNA 的粘性末端将在 70℃ 热处理后保持在一起。
7、注意事项
（1）反应条件：在 1X Taq DNA 连接酶缓冲液中以 45℃ 温育 DNA 和酶 15 分钟；或在热循环仪中温育 DNA 和酶，温育程序适用于 Barany 在《Genetic Disease Detection and DNA Amplification Using Cloned Thermostable Ligase》（利用克隆的热稳定连接酶进行遗传病检测和 DNA 扩增）（1991 年）中描述的反应。Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 189-193. 用 50% 甘油、50 mM EDTA、溴酚蓝的混合物终止反应。
（2）1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液需要 NAD+ 作为辅因子。在 10X Taq DNA 连接酶反应缓冲液中已添加 NAD+；为延长 NAD+ 辅因子的半衰期，缓冲液应该 -80℃ 条件贮存。
（3）Taq DNA连接酶不会连接短的4个碱基的重叠片段（典型的限制性内切酶消化产物），而它能够有效地连接12个碱基对的突出末端。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| 243-MCT-C-0.6-BAG | 0.6 ml 微量离心管 | 1000 个/盒 | 商城订购 |
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| M0208L | Taq DNA 连接酶 | 10,000 units | 商城订购 |
| M0208S | Taq DNA 连接酶 | 2,000 units | 商城订购 |
| M0208V | Taq DNA 连接酶 | 1,000 units | 商城订购 |
