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Luna® 通用 qPCR 预混液

Luna® Universal qPCR Master Mix

产品概述 技术指标 配套产品 订购信息 精彩视频 相关资料
详细描述:
染料法定量 PCR(qPCR)通过双链 DNA(dsDNA)结合染料(常用的染料为 SYBR® Green I)的荧光,来实时测量每个 PCR 循环过程中的 DNA 扩增。通过荧光信号显著超过背景荧光所经历的循环数,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品之间的靶基因相对丰度,或者参考通过已知浓度样品绘制的标准曲线,对未知样品绝对定量。 Luna 通用 qPCR 预混液是经优化的 2X 反应预混液,可以用于对靶标 DNA 序列进行实时 qPCR 检测和定量,适用于使用大多数实时荧光定量 qPCR 仪器的 SYBR®/FAM 通道。该预混液包含热启动 Taq DNA 聚合酶,还添加了独特的惰性参比染料,该染料可与多种 qPCR 仪器兼容(包括需要高 ROX 或低 ROX 参比信号的仪器)。独具特色的是:预混液还包含可防止交叉污染的 dUTP,以及有助于观察反应体系建立的非荧光可见示踪染料。该染料的光谱与 qPCR 荧光染料不重叠,因此不会影响到实时检测数值。 该预混液浓度为 2X,包含 DNA 扩增和定量所需的所有 PCR 组分(引物和 DNA 模板除外)。使用 Luna qPCR 配合已有的商品化的 qPCR 测定引物,可对基因组 DNA 或感兴趣的 cDNA 进行定量检测。 图 1:Luna 通用 qPCR 预混液具有更高的灵敏度、更出众的可重复性以及更优异的 RT-qPCR 表现 使用 Luna 通用 qPCR 预混液检测人 GAPDH 基因,起始量模板为 6 个 10 倍梯度稀释的 Jurkat cDNA(20 ng - 0.2 pg),每个浓度的样品做 8 次重复。cDNA 使用 NEB 的 Protoscript® II cDNA 第一链合成试剂盒(NEB #E6560)从 Jurkat 总 RNA 中反转录获得。 图 2:Luna 通用 qPCR 预混液试剂盒可对各种来源的 DNA 进行灵敏准确的检测和定量分析 Luna 通用 qPCR 预混液适用于各种来源的基因组 DNA 模板。使用 ABI 7500 荧光定量仪器,以 50 ng - 0.5 pg 基因组 DNA 作为模板对靶标基因进行定量检测。基因组 DNA 通过柱提法纯化获得。在这些示例中,无论是小鼠肾脏基因组 DNA 的 ACTB(编码 β-肌动蛋白)、烟草的 psbB(Photosystem II CP47 反应中心蛋白 PsbB)还是酵母的 RDN18(18S 核糖体 RNA),Luna 产品都展现了稳健的扩增性能。 图 3:与市售的染料法 qPCR 试剂相比,Luna 产品展现出更好的稳定性和特异性 使用 NEB 和其它品牌的 qPCR 试剂对 16 - 18 个不同丰度、长度和 GC 含量的目的基因进行 qPCR 测试,以 Jurkat 基因组 DNA 或 Jurkat cDNA 为模板(使用 Bio-Rad 仪器检测 10 个基因组模板和 8 cDNA 模板,使用 ABI 的仪器检测 9 个基因组模板和 7 个 cDNA 模板)。每份检测结果由两个实验者根据厂商说明书获得。从以下方面评估了测试结果:扩增效率、痕量样本检测能力及无模板扩增值(ΔCq = 无模板对照的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq)。此外,一致性、可重复性以及曲线的整体质量评估也作为实验的参考(质量分数)。柱状图展示了符合可接受的性能标准的百分比(由点图上的绿色框表示,质量分数 > 3)。NEB 和其它品牌测试结果如下:Bio-Rad,SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix;Roche,FastStart™ SYBR Green Master;QIAGEN,QuantiTect® SYBR Green PCR Kit;ABI,PowerUP™ SYBR Green Master Mix;Promega®,GoTaq® qPCR Master Mix。Luna 通用 qPCR 预混液性能优于其它测试试剂。 图 4:Luna 通用 qPCR 预混液包含惰性蓝色示踪染料,可避免加样错误。
贮存条件 建议贮存于 -20℃。
货号 产品名称 品牌 购买
货号 名称 单位 购买
M3003S Luna® 通用 qPCR 预混液 200 rxns 商城订购
M3003L Luna® 通用 qPCR 预混液 500 rxns 商城订购
M3003X Luna® 通用 qPCR 预混液 1000 rxns 商城订购
M3003E Luna® 通用 qPCR 预混液 2500 rxns 商城订购
M3003V Luna® 通用 qPCR 预混液 100 rxns 商城订购
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