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蛋白酶 K，分子生物学级
Proteinase K, Molecular Biology Grade
蛋白酶 K 经高度表征，具有更稳定一致的性能。它是一种枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶，可水解多种肽键。蛋白酶 K 在很宽的温度和缓冲液条件范围内具有活性，最佳活性温度在 20 至 60℃ 之间，最佳活性 pH 在 7.5 - 12.0 之间。
在反应中添加最高 2% SDS 或最高 4 M 尿素可促进活性。钙盐对于蛋白酶 K 的热稳定性十分重要，但对催化而言不是必需的，所以蛋白酶 K 在含有 EDTA 等螯合剂的缓冲液中也有活性。
产品特点：
1、高度表征从而保证更稳定一致的性能
2、拥有最佳活性和稳定性，可稳定贮存长达 24 个月
3、在很宽的温度和缓冲液条件范围内具有活性，最佳活性温度在 20 至 60℃ 之间，最佳4、活性 pH 在 7.5 - 12.0 之间。
5、不含核酸内切酶、核酸外切酶、DNase 或 RNase 污染活性
应用特性：
1、分离质粒和基因组 DNA
2、分离 RNA
3、在反应中使 RNase、DNase 和酶失活
4、去除 DNA 中的酶，提高克隆效率（5）
5、PCR 纯化
批间差：与其它厂家同类产品对比（图1）
NEB 三个批次的蛋白酶 K 与另一厂家三个批次产品的活性检测结果对比。报告显示，所有批次的 NEB 产品活性为 800 Units/ml ± 10%（以黑线表示，标注了误差条）。对其他厂家三个批次产品进行直接检测，发现其检测结果均远远低于其文件公布的测定结果。
活性检测：与其它厂家同类产品对比（图2）
单一批次的 NEB 蛋白酶 K 与其它七个厂家单批次产品的活性检测结果对比。在售的 NEB 蛋白酶 K 活性为 800 Units/ml ± 10%（以黑线表示，标注了误差条），而大部分其它厂家的蛋白酶 K 活性标注为 > 800 或 > 600 Units/ml。部分厂家的蛋白酶 K 接近其标注的活性值，而其他厂家的蛋白酶 K 的活性与预期存在巨大差距。
1、单位定义
1 单位是指在 37℃ 条件（pH 7.5）下，每分钟酶切尿素变性血红蛋白，产生相当于 1.0 μmol 酪氨酸的吸光度（使用 Folin & Ciocalteu 酚试剂测定）所需的酶量（6）。
2、贮存溶液
20 mM Tris-HCl
1 mM CaCl2
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C
3、热失活
95°C for 10 minutes
4、分子量
理论上的: 28.9 kDa
5、单位活性检测条件
将 0.5 – 2 μg 的蛋白酶 K 与 2% 变性血红蛋白溶液在 37℃（pH 7.5）温育 10 分钟。沉淀、中和后，添加 Folin & Ciocalteu 酚试剂，在 750 nm 波长处测定可溶性切割产物的吸光度。将吸光度与采用类似方法制备的酪氨酸吸光度标准曲线进行对比。
6、注意事项
（1）在多种反应缓冲液中均有活性，包括所有 NEB 特有的限制性内切酶缓冲液。在 pH 7.5 - 12 和 20 - 60℃ 活性较高。蛋白酶 K 在 EDTA 等螯合剂中也有活性，添加最高 2% SDS 或 4 M 尿素可促进活性。
（2）蛋白酶 K 可在 –20℃ 稳定贮存至少 2 年。10 次冻融循环后仍不会丧失活性。
（3）反应条件
蛋白酶 K 在多种反应缓冲液中均有活性，包括所有 NEB 特有的限制性内切酶缓冲液。在 pH 7.5 - 12.0 和 20 - 60℃ 活性较高。蛋白酶 K 在 EDTA 等螯合剂中也有活性，添加最高 2% SDS 或 4 M 尿素可促进活性。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
