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α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A
a2-3,6,8,9 Neuraminidase A
神经氨酸苷酶是乙酰神经氨酸水解酶(唾液酸酶)的俗称。 α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A 催化水解糖蛋白和寡糖中所有线型和分支型非还原末端唾液酸残基。 该酶催化水解 α2-3 和 α2-6 键的能力略高于催化水解 α2-8 和 α2-9 键的能力。它可用于体外和体内聚糖分析和表征以及完整糖蛋白重塑。
产品优势:
1、没有检测到内切糖苷酶或其他外切糖苷酶污染活性的重组酶;
2、对Neu5Ac和Neu5Gc都有作用;
3、与其他外糖苷酶和内糖苷酶双重消化;
4、可耐受中等水平(0.5-1.0%)的洗涤剂;
5、SDS-PAGE和完整ESI-MS测定纯度≥95%;
6、最佳活性和稳定性长达24个月。
产品特异性:
α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A 去除与内部残基相连的分支型唾液酸残基。 胎球蛋白的寡糖是可以被有效切割的侧分支型唾液酸残基的典型示例(1)。
1、单位定义
1 单位指 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内将 1 nmol Neu5Acα2-3Galβ1- 3GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc-AMC 中超过 95% 的末端 α-Neu5Ac 水解所需要的酶量。
2、反应条件
1X GlycoBuffer 1
Incubate at 37°C
1X GlycoBuffer 1
5 mM CaCl2
50 mM sodium acetate
(pH 5.5 @ 25°C)
3、贮存溶液
50 mM NaCl
20 mM Tris-HCl
1 mM EDTA
pH 7.5 @ 25°C
4、热失活:65°C for 10 minutes
5、分子量 实际: 100000 Da
6、比活度:316,000 unit/mg
7、单位活性检测条件
在 10 μl 1X GlycoBuffer 1 反应体系中,将两倍稀释的 α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A 与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况(2)。
8、注意事项
(1)如需更大反应体积,可按比例扩大反应体系。
(2)酶切底物不同,所需糖苷外切酶的量也不同。在 10–25 μl 的反应体系中,1 μg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时,酶的起始量范围为 1–2 μl。如果酶切不完全,可让反应过夜。
(3)切割分支结构,建议增加酶量并延长温育时间。
货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
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