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糖苷内切酶 H
Endo H
糖苷内切酶 H 是一种重组型糖苷酶,能对 N-连接糖蛋白的高甘露糖型和某些杂合型寡糖的壳二糖核心结构进行切割。
产品优势:
1、重组表达酶,无糖苷外切酶或其它糖苷内切酶污染
2、无甘油剂型,有助于在 HPLC 和质谱分析中获得最佳结果
3、纯度 ≥ 95%(经 SDS-PAGE 和 ESI-MS 测定)
4、拥有最佳活性和稳定性,可稳定贮存长达 24 个月
特异性(图1)
在标准测定条件下,将60µg RNase B与3000单位Endo H或Endo-Hf一起孵育.在不同时间点取出等分试样,并测量释放的碳水化合物。[Dubois等人(1956)《分析化学》28350-356]。(图2)
移动性转移分析
在标准测定条件下,每10µg RNase B孵育1单位Endo H、Endo-Hf或PNGase F。在不同的时间点,取出等分试样,在10-20%SDS-PAGE凝胶上分析碳水化合物(CHO)的释放。1单位定义为在37°C下1小时内从10µg RNase B中去除>95%碳水化合物所需的酶量。(图3)
1、单位定义
一个单位定义为在37°C下1小时内从10µg变性RNase B中去除>95%碳水化合物所需的酶量,总反应体积为10µl(10 NEB单位=1 IUB毫单位)。
单位定义分析:
10µg RNase B在100°C下用1X糖蛋白变性缓冲液变性10分钟。加入1X GlycoBuffer 3后,加入两倍稀释的Endo H,并将反应混合物在37°C下孵育1小时。反应产物的分离通过SDS-PAGE可视化。
1X糖蛋白变性缓冲液
0.5%SDS
40 mM DTT
2、反应条件
1X糖缓冲液3,在37°C下孵育
1X糖缓冲液3:
50 mM乙酸钠
(25°C时pH值为6)
3、贮存溶液
20mM Tris-HCl
50 mM氯化钠
5 mM EDTA
25°C时pH值为7.5
4、热失活
75°C,持续10分钟
5、分子量
实际:29 kDa
6、应用特性
从糖蛋白中去除高甘露糖N-聚糖
货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
---|---|---|---|
SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒,10盒/组,5组/箱 | 商城订购 |