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Bst 2.0 DNA 聚合酶

Bst 2.0 DNA Polymerase

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Bst 2.0 DNA 聚合酶是嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)DNA 聚合酶 I 大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ DNA 的聚合酶活性和强链置换活性,但缺失 5´→3´ 核酸外切酶活性。与野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,Bst 2.0 DNA 聚合酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性。


产品特性:

1、为环介导等温扩增(LAMP)进行了优化

2、与 Bst DNA 聚合酶相比,扩增反应性能得到改善

3、快速聚合

4、与野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段(NEB #M0275)相比,反应条件灵活,具有更高的耐盐性和热稳定性

5、提供 WarmStart® 温启动版本(NEB #M0538),可在室温条件下建立反应体系,提高反应效率


M0537L 图1.png

LAMP 耐盐性

使用 Bst 2.0 进行 LAMP 反应时,盐量的增加表明其对抑制剂的耐受力增强。当野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段被完全抑制时,Bst 2.0 仍可保持较高活性。(图1)


1733984231856445.png

快速 LAMP 检测

在 LAMP 实验中扩增不同靶标,结果表明,使用 Bst 2.0 可以比 Bst 大片段更快达到扩增阈值。(图2)


1733984259862304.png



1、单位定义

1 单位指在 65℃ 条件下,30 分钟催化 25 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

2、反应条件

1X 等温扩增缓冲液套装

Incubate at 65°C

3、1X 等温扩增缓冲液套装

20 mM Tris-HCl

10 mM (NH4)2SO4

50 mM KCl

2 mM MgSO4

0.1% Tween® 20

(pH 8.8 @ 25°C)

4、贮存溶液

10 mM Tris-HCl

50 mM KCl

1 mM DTT

0.1 mM EDTA

50% Glycerol

0.1% Triton® X-100

pH 7.1 @ 25°C

5、热失活:80°C for 20 minutes

6、单位活性检测条件

50 mM KCl、20 mM Tris-HCl(pH 8.8)、10 mM MgCl2、30 nM M13mp18 单链 DNA、70 nM M13 测序引物(–47)24 mer、200μM dATP、200 μM dCTP、200 μM dGTP、100 μM dTTP,包括 [3H]-dTTP 和 100 μg/ml BSA。


货号 产品名称 单位 购买
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N0447L dNTP 混合液 40 μmol of each 商城订购
货号 名称 单位 购买
M0537L Bst 2.0 DNA 聚合酶 8,000 units 商城订购
M0537S Bst 2.0 DNA 聚合酶 1,600 units 商城订购
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