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Phusion® 超保真 DNA 聚合酶
Phusion High-Fidelity DNA Polymerase
超保真 DNA 聚合酶对于扩增后需要 DNA 序列正确的应用非常重要。其拥有的独特结构包括一种类似火球菌属（Pyrococcus）来源的新型酶，以及一个持续合成能力强的结构域，二者融合在一起，可提高保真度和扩增速度。Phusion DNA 聚合酶是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增的扩增子。Phusion 是目前具有最高扩增准确性的热稳定型聚合酶之一，错配率不到 Taq DNA 聚合酶的 1/50，是火球菌（Pyrococcus furiosus）DNA 聚合酶（1）的 1/6。Phusion DNA 聚合酶具有 5´→3´ 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，可生成平末端产物。
Phusion DNA 聚合酶随附标准 5X Phusion HF 缓冲液，以及 5X Phusion GC 缓冲液，可用于复杂模板或高 GC 含量模板。这些缓冲液都含有 MgCl2（最终 [1X] 反应浓度为 1.5 mM）。也可使用提供的 DMSO 或 MgCl2 溶液优化反应。
用于快速和高性能 PCR。Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶由 NEB 公司生产并进行质量控制，兼备高保真度和稳定扩增的性能。
产品优势：
1、稳定的反应体系--优化工作极少，成功率极高
2、超高保真度--比 Taq 高 50 倍以上。
3、快速--显著缩短延伸时间（是 Pfu 酶的 10 倍）
4、高产量--使用最少量的酶提高产物产量
5、通用性--可用于常规 PCR 以及长片段或难扩增的模板
使用基于 lacI 的方法（改造自 Frey 和 Suppman 在 1995 年提出的方法）进行保真度测定。（图1）
以 50 ng Jurkat 基因组 DNA 为模板，用不同的聚合酶扩增长度为 3.8 kb 的片段。根据产品说明书中的推荐条件建立反应体系。延伸时间已在图中标出（以分钟为单位）。Ladder L 是 1 kb DNA Ladder（NEB #N3232）。（图2）
1、单位定义
1 单位是指在 74℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。
2、贮存溶液
20 mM Tris-HCl
100 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
1X stabilizers
pH 7.4 @ 25°C
3、热失活：否
4、5' - 3' 核酸外切酶：否
5、3' - 5' 核酸外切酶：是
6、单位活性检测条件
25 mM TAPS-HCl（25℃ 时 pH 9.3）、50 mM KCl、2 mM MgCl2、1 mM -巯基乙醇、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| 267-PLT-C-96 | 0.2 ml 96孔无裙边 PCR板 | 10 板/包，5 包/箱 | 商城订购 |
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| N0447L | dNTP 混合液 | 40 μmol of each | 商城订购 |
