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核酸外切酶 III（E. coli）
Exonuclease III (E. coli)
该酶作用于双链 DNA，沿 3´ 羟基末端方向逐步催化去除单核苷酸（1）。每次酶与底物结合催化时，只有少量核苷酸被去除，从而在 DNA 分子群内产生渐进缺失（2）。报告显示，核酸外切酶 III 也有 RNase H 活性、3´ 磷酸酶活性和脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶活性（1）。
尽管该酶也可作用于双链 DNA 的切刻以产生单链缺口，但其最适底物是平末端或 3´ 凹陷末端。 3’突出末端切割活性被抑制 抗切割程度随突出末端的长度而变化，四碱基或更长的突出末端则几乎完全抑制切割。
核酸外切酶 III 的活性部分依赖螺旋结构（4），并根据序列的不同而有所差异（C>A=T>G；参考文献 5）。温度、盐浓度和酶与 DNA 的比例对酶活性影响很大，需要根据特定应用调整反应条件。
产品特点：
1、双链 DNA 特异性核酸外切酶
2、在具有 5´ 突出末端或平末端以及不足四个碱基长的 3´ 突出末端的线性双链 DNA 的 3´ 末端处起始消化
3、在双链 DNA 的切刻位点处起始消化
4、作用于线性或切刻双链 DNA，沿 3´→5´ 方向催化切除核苷酸
5、在具有 3´ 突出末端的单链 DNA 和线性双链 DNA 上活性较低
6、突出末端长度超过 4 个核苷酸时，酶活性会受到抑制
1、单位定义
1 单位指在 1X NEBuffer 1 中，37℃ 条件下，总反应体积为 50 μl 时，30 分钟催化超声处理的 0.15 mM [3H]-标记双链 DNA 产生 1 nmol 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。
2、反应条件
1X NEBuffer™ 1
Incubate at 37°C
3、1X NEBuffer™ 1
10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
10 mM MgCl2
1 mM DTT
(pH 7 @ 25°C)
4、贮存溶液
5 mM KPO4
200 mM KCl
5 mM β-ME
0.05 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 6.5 @ 25°C
5、热失活
70°C for 20 minutes
6、比活度
150,000 units/mg
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 4381 | 0.1-2ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 4382 | 0.5-10ul单道移液器 | 1 unit | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| M0206L | 核酸外切酶 III（E. coli） | 25,000 units | 商城订购 |
| M0206S | 核酸外切酶 III（E. coli） | 5,000 units | 商城订购 |
| M0206V | 核酸外切酶 III（E. coli） | 2,500 units | 商城订购 |
