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高保真限制性内切酶NotI-HF®
NotI-HF®
高保真（HF®）限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性，但经过改造后显著降低星号活性，并使用统一的缓冲液（rCutSmart™ 缓冲液）。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较，虽然价格相同，但性能和性价比更高：
1、为提高性能进行基因工程改造
2、在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性
3、符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
4、降低星号活性
5、随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
6、限制性内切酶酶切位点：GC/GGCCGC
图：用多供应商的 EcoRI、NotI 和 BamHI，在含有荧光标记单链平末端、双链平末端、3’ 突出末端 或 5’ 突出末端的寡核苷酸中进行测试。 通过毛细管电泳和峰值分析确定降解百分比。分辨率达到 单核苷酸水平。
1、单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 μg pBC4 DNA 所需的酶量。
2、反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37°C
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25°C)
3、在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 25%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 25%
rCutSmart™ Buffer: 100%
4、稀释兼容性：稀释液 A
5、贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C
6、热失活
65°C for 20 minutes
7、甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 阻断酶切
8、同裂酶：CciNI、NotI
9、贮存条件
建议将试剂盒贮存于 -20℃。
10、注意事项
NotI-HF® 的特异性与 NotI（NEB #R0189）相同，但经过改造后星号活性降低。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒，10盒/组，5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| R3189L | 高保真限制性内切酶NotI-HF® | 2,500 units | 商城订购 |
| R3189V | 高保真限制性内切酶NotI-HF® | 250 units | 商城订购 |
| R3189S | 高保真限制性内切酶NotI-HF® | 500 units | 商城订购 |
| R3189M | 高保真限制性内切酶NotI-HF® | 高浓度5X，2,500 units | 商城订购 |
