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限制性内切酶DpnII
DpnII
限制性内切酶DpnII符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切,酶切位点:/GATC。


1、单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA(dam-)所需的酶量。
2、反应条件
1X NEBuffer™ DpnII
Incubate at 37°C
3、1X NEBuffer™ DpnII
50 mM Bis-Tris-HCl
100 mM NaCl
10 mM MgCl2
0.1 mM DTT
(pH 6 @ 25°C)
4、在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 25%
NEBuffer™ r2.1: 25%
NEBuffer™ r3.1: 100%
rCutSmart™ 缓冲液: 25%
5、稀释兼容性:稀释液 B
6、贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
500 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25°C
7、热失活
65°C for 20 minutes
8、甲基化敏感性
dam 甲基化: Blocked
dcm 甲基化: Not Sensitive
CpG甲基化: Not Sensitive
9、同裂酶:Bsp143I、BssMI、BstKTI、BstMBI、Kzo9I、MboI、NdeII、Sau3AI
10、注意事项
(1)DpnII 和 Sau3AI 是 MboI 的完全同裂酶。
(2)切割产生 5´ GATC 突出末端,该末端可高效地连接由 BamHI、BclI、BglII、MboI、Sau3AI 和 BstYI 酶切生成的 DNA 片段。
(3)dam 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息,请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。
(4)在 NEBuffer r3.1 缓冲液中可能出现星号活性。推荐使用 NEB DpnII 专用缓冲液。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| SI-0246 | Vortex-Genie2 多功能漩涡振荡器 | 1 set | 商城订购 |
| 244-PCR-C-0.2-BAG | 0.2ml PCR管 | 1000 个/包 | 商城订购 |
| 221-R-C-10S | 0.5-10ul 盒装灭菌吸头 | 96支/盒,10盒/组,5组/箱 | 商城订购 |
| 货号 | 名称 | 单位 | 购买 |
|---|---|---|---|
| R0543S | 限制性内切酶DpnII | 1,000 units | 商城订购 |
| R0543L | 限制性内切酶DpnII | 5,000 units | 商城订购 |
| R0543T | 限制性内切酶DpnII | 高浓度5X,1,000 units | 商城订购 |
| R0543M | 限制性内切酶DpnII | 高浓度5X,5,000 units | 商城订购 |
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