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Monarch® 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒
Monarch® Spin PCR & DNA Cleanup Kit
Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）提供了一种高效的方法，用于从 PCR、限制性酶切、连接和反转录等酶促反应中纯化和浓缩高达 5 μg 的高品质双链和单链 DNA。
这一新版本试剂盒配备升级版离心柱，经精密工程化设计，专为实现小体积（低至 5 μl）洗脱，进而纯化得到高浓度 DNA，适用于测序、限制性酶切、文库制备、标记和其它酶促实验等下游应用。该试剂盒包含离心柱、收集管、缓冲液和其它试剂，采用紧凑简单的包装，适用于基于硅胶膜的 PCR 纯化和 DNA 纯化。
随附的缓冲液系统经过优化，可高效地结合并纯化 DNA，无需检测 pH 值。离心柱和缓冲液瓶经过独特设计，减少了塑料用量，因此与行业主流供应商相比，这些试剂盒的塑料使用量大幅减少，同时仍然能够在离心或真空操作和其它步骤中保持结构完整性。
该试剂盒配备的 Monarch 离心柱，使用先进的自动化器械制造，保证了高质量和批间一致性。
产品优势：
1、高性能：可从纯化 DNA 中提取高产量（高达 5 μg）、高纯度和高浓度的 DNA，并能够去除较短的引物、洗涤剂和其它低分子量反应组分（例如核苷酸、DMSO、甜菜碱）。
2、高浓度：可实现小体积（低至 5 μl）洗脱，进而纯化得到高浓度 DNA。
3、灵活便捷：仅需一款试剂盒，即可按照提供的改良版操作流程纯化包括寡核苷酸在内的 DNA 小片段。
4、省时：仅需 5 分钟的温育和离心时间来完成包含结合、洗涤和洗脱步骤的实验流程。
5、独特设计：离心柱设计独特，支持小体积洗脱并最大限度减少缓冲液滞留和残留污染。
6、经过优化：缓冲液系统经过优化，无需调节 pH 值。
7、应用兼容性：纯化后的 DNA 可直接用于下游分子应用，例如限制性酶切、DNA 测序、连接、扩增以及其它酶促反应。
图 1：Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）可重复性高，与行业主流供应商相比，具有同等或更高的回收率和纯度，并且提取的 DNA 浓度更高
使用 Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg），DNA 的浓度和回收率等于或高于行业主流供应商的试剂盒。以 5 μg 的 3 kb 线性 DNA 片段作为起始样本，按照推荐的操作流程和洗脱体积回收 DNA 片段。使用 Trinean DropSense 16 检测 DNA 浓度，并根据洗脱的 DNA 浓度和所用的洗脱体积计算回收率百分比。
图 2：使用 Monarch® 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）纯化得到的 DNA 质量高并且适用于下游应用
使用 Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒可高效地纯化 DNA，并适用于下游应用，其性能与行业主流供应商的试剂盒相当。
A. TBE PAGE 数据展示的是引物去除。在 2 kb DNA 片段中掺入两个寡核苷酸（16-mer、25-mer），终浓度 1 μM。按照推荐的操作流程对混合物进行纯化。将等量的原始混合物和纯化后的 DNA 上样到 20% TBE 聚丙烯酰胺凝胶电泳上，100V 电泳 1 小时，然后使用 SYBR Gold 染色。M = 低分子量 DNA Ladder（NEB #N3233）。
B. 琼脂糖凝胶数据展示的是使用盐敏感的限制性内切酶进行限制性酶切的下游应用。纯化 DNA 随后进行限制性酶切，重复该流程三次。纯化 4 μg 3 kb 的 DNA 片段，使用 DraIII-HF（NEB #R3510）对 1 μg 片段进行酶切。完成酶切反应后，将等量的起始 DNA 在 1.2% TBE 琼脂糖凝胶上进行分离。
图 3：按照寡核苷酸纯化操作流程，使用 Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）可高效地纯化寡核苷酸 DNA。
Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）可高效地纯化并回收合成的单链 DNA（≥ 16 nt）和双链 DNA（≥12 bp）寡核苷酸。以 1 μg 不同长度的寡核苷酸（8 – 25 nt/bp）作为起始样本，按照提供的寡核苷酸纯化操作流程进行操作。DNA 在 20 μl Monarch EY 洗脱缓冲液中洗脱。使用 Trinean DropSense 16 检测 DNA 浓度，并根据洗脱的 DNA 浓度和所用的洗脱体积计算回收率百分比。将可使用的最小单链和双链寡核苷酸标上星号（*）。
图 4：Monarch S1A 离心柱的特性
NEB® Monarch 独特的离心柱设计和膜组装支持以较小的洗脱体积实现高质量的 DNA 纯化，得到适用于多种下游应用的高浓度 DNA。该离心柱经过专门设计，塑料用量大幅减少，降低了对环境的不利影响。
图 5：Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）实验流程概览
Monarch 离心柱法 PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）使用结合/洗涤/洗脱方法和设计独特的离心柱。
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