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Monarch® 离心柱法质粒小提试剂盒
Monarch® Spin Plasmid Miniprep Kit, 250 preps
Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒提供独特的质粒制备和纯化方法,可实现从多种细菌菌株中提取高浓度的质粒 DNA,产生高达 20 μg 的高质量 DNA。这一新版本试剂盒配备升级版离心柱,经精密工程化设计,专为实现小体积(低至 30 μl)洗脱,进而纯化得到高浓度 DNA,适用于测序、限制性酶切、转化、转染等下游应用。有色缓冲液系统有助于指示关键裂解以及中和步骤的完成,便于实验人员遵循实验流程,缩短和加快操作流程,进而减少手动操作时间和离心时间。离心柱和缓冲液瓶经过独特设计,减少了塑料用量,因此与行业主流供应商相比,这些试剂盒的塑料使用量大幅减少,同时仍然能够在离心或真空操作和其它步骤中保持结构完整性。该试剂盒配备的 Monarch 离心柱,使用先进的自动化器械制造,有助于实现高质量和批间一致性。
图 1:Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒可重复性高,与行业主流供应商相比,具有同等或更高的产量和纯度,并且提取的质粒 DNA 浓度更高。
对于多种不同的质粒,使用 Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒得到的 DNA 浓度、产量和纯度均高于使用行业主流供应商试剂盒得到的 DNA 浓度、产量和纯度。按照推荐的操作流程,分别对 pUC19 和 pHT01 使用约 1 ml(OD600 = 3)、对 Rluc 和 pXba 使用约 2 ml(OD600 = 6)相同的过夜培养物进行质粒提取。使用 Trinean DropSense 16 检测质粒浓度。
图 2:使用 Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒纯化得到的质粒 DNA 质量高并且适用于下游应用
凝胶电泳数据显示,使用 Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒纯化得到的质粒 DNA,与使用行业主流供应商的试剂盒相比,在限制性酶切等下游应用中的表现相当。凝胶电泳数据显示了质粒纯化和随后的限制性酶切的三组重复数据。按照推荐的操作流程,分别对 pUC19 和 pHT01 使用约 1 ml(OD600 = 3)、对 Rluc 和 pXba 使用约 2 ml(OD600 = 6)相同的过夜培养物进行质粒提取。分别从每组提取的质粒中取出 1 μg,使用 XmnI(NEB #R0194)(对于 pUC19、RLuc 和 pXba)和 EcoRI(NEB #R0101)(对于 pHT01)进行酶切线性化质粒,并通过 1.2% w/v TBE 凝胶电泳进行分析。
图 3:Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒支持低至 30 μl 的洗脱体积,并实现高产量
Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒可通过多种洗脱体积得到高产量、高浓度的 DNA。使用 2 ml 已转入 pUC19 质粒(NEB #N3041)的 NEB 10-beta E. coli 感受态细胞(NEB #C3019)作为样本。使用 Monarch EY 缓冲液以指定体积洗脱质粒。使用 Trinean DropSense 16 检测质粒浓度。
图 4:用于质粒与核酸纯化的 Monarch S2D 离心柱的特性
NEB® Monarch 独特的离心柱设计和膜组装支持以较小的洗脱体积实现高质量的核酸纯化,得到适用于多种下游应用的高浓度核酸。该离心柱经过专门设计,塑料用量大幅减少,降低了对环境的不利影响。
图 5:Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒实验流程概览
Monarch 离心柱法质粒小提试剂盒提供独特的离心柱和经过优化、基于碱裂解的缓冲液。
1、纯化方法:专为核酸纯化设计的离心柱,可防止缓冲液滞留和盐分残留污染
2、兼容方法:离心或真空处理
3、设计用途:从多种大肠杆菌宿主菌株和其它微生物菌株中提取和制备质粒,使用有色缓冲液系统来指示关键步骤的完成,更易遵循实验流程
4、质粒 DNA 产量:高达 20 μg*
5、培养物体积:1 - 5 ml,不超过 15 个 OD 单位
6、离心柱结合能力:高达 20 μg
7、质粒大小:长达 25 kb
8、洗脱体积:≥ 30 μl
9、DNA 纯度:A260/280 > 1.8,A260/230 > 1.8
10、操作流程时间:离心和温育时间为 9.5 - 12.5 分钟
11、兼容的下游应用:限制性酶切和其它酶促实验、转化、转染、DNA 测序、PCR、标记、无细胞蛋白表达等
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