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PURExpress® Δ RF123 试剂盒
PURExpress® Δ RF123 Kit
PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译体系，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 体系无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了 DNA 和 RNA模板/复合体，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时内即可获得实验结果，PURExpress 体系大大地节省了宝贵的实验时间，是用于高通量技术的理想选择。
图 1：使用 PURExpress® 体外蛋白合成试剂盒的表达蛋白。
在 25 μl 反应体系中加入 250 ng 模板 DNA 和 20 单位 RNase 抑制剂，37℃ 温育 2 小时。各取 2.5 μl 反应液使用 10 – 20% Tris-甘氨酸凝胶进行 SDS-PAGE 电泳分析。红点处指示为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703 已停产，被 NEB #P7717 替代）。
图 2： 添加 35S-甲硫氨酸通过放射自显影显示蛋白。
在 25 μl 反应中加入 250 ng 模板 DNA、20 单位 RNase 抑制剂和 2 μl 35S-甲硫氨酸， 37℃ 温育 2 小时。各取 2.5 μl 反应液进行 SDS-PAGE 电泳分析，将凝胶固定 10 分钟， 80℃ 干燥 2 小时，并在 -80℃ 条件下使用 x 射线胶片曝光 5 小时。
图 3：使用 PURExpress 体系表达和反向纯化 DHFR（A）和 T4 DNA 连接酶（B）。
根据随附产品说明书中的建议，使用 125 μl 的反应体系。样本使用经考马斯亮蓝染色的 10 – 20% Tris-甘氨酸凝胶进行分析。在这两种情况下，目的蛋白都可以在总蛋白质的条带中可见。红点处指示为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703 已停产，被 NEB #P7717 替代）。
1、贮存条件:建议贮存于 -80℃。
2、注意事项
（1）阳性对照反应中，加入 2 μl 对照（DHFR）模板以及随附的每个释放因子各 0.5 μl。
（2）每个试剂盒提供的试剂足够进行 10 次反应（25 µl 反应体系/次）。
（3）该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质合成/核糖体展示实验。
（4）释放因子没有添加在溶液 B 中。根据您的实验和蛋白质模板设计，您可能仍然会观察到一个低水平的翻译终止过程。
| 货号 | 产品名称 | 单位 | 购买 |
|---|
