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【Nature】Odyssey助力突破“精准靶向”难题！高分文章发不停
研究背景 细胞表面蛋白质组成因细胞类型而异，且在疾病状态下常发生改变，精准识别和操控细胞表面蛋白对于疾病诊断、治疗以及基础生物学研究具有重要意义，传统的靶向策略大多依赖于单一表面抗原的识别，但单一抗原几乎无法精确定义特定细胞类型，为了克服以上限制，普林斯顿大学Tom W. Muir研究团队提出了一种新型的细胞表面靶向技术SMART（splicing-modulated actuation upon recognition of targets），通过整合多细胞表面特征实现特异性识别，并利用汇聚式蛋白质连接技术，在目标细胞表面将无活性的多肽片段高效拼接为有活性的功能蛋白。该技术将条件性蛋白质剪接（CPS）与细胞靶向识别完美结合，具有高度的选择性和灵活性，可以用于细胞系统的局部检测或操纵，具有重要的应用前景。相关研究“Programmable protein ligation on cell surfaces”于今年7月30日发表在国际生命科学顶尖期刊《Nature》上。 Odyssey作用 本研究通过Odyssey系统进行考马斯亮蓝染色SDS-PAGE凝胶成像和双色定量western blot实验检测。SDS-PAGE凝胶成像通过检测凝胶中蛋白质的分离情况，验证重组蛋白质的表达、纯化效果及分子量正确性，确保后续实验（如蛋白质剪接、细胞表面靶向）所用蛋白的质量；Western Blot实验用于深入验证 SMART系统的靶向性、剪接效率及功能，从而确保实验结论的可靠性。Odyssey系统基于稳定的荧光检测以及多通道同时成像方式，无需剪膜即可同步检测内参和目的蛋白的信号，更加符合期刊杂志对数据发表的要求，其检测结果为本研究的实验结论提供了重要的数据支撑。 本研究中，为证明SMART系统可通过灵活组合靶向模块，实现对特定“双抗原阳性细胞”表面微环境的精准蛋白质组探测，研究人员通过Western Blot 实验验证SMART系统在不同细胞系中对多种抗原组合的靶向标记能力，结果显示，仅当细胞表达SMART系统预设的两种抗原时，才能检测到明显的生物素化蛋白条带，证明SMART系统的邻近标记具有严格的细胞特异性，且适用于不同来源的细胞系，并且邻近标记效率与目标细胞的抗原表达水平正相关，如下图所示。 不仅如此，本篇研究还基于Odyssey系统进行了大量的Western blot实验验证蛋白质相互作用、条件性剪接活性、细胞表面靶向效率及功能相关性等，部分原始图像如下所示： 未裁剪原图-文献附件 LICORbio Odyssey系统在Western blot成像中的优势 1. LICORbio Odyssey能够在同一张膜上同时成像多个条带，无需剪膜，满足了期刊杂志对于目的蛋白和内参蛋白在同一膜上成像的要求。 2. 在进行蛋白质磷酸化Western Blot分析检测时，LICORbio公司的Odyssey 双色近红外荧光Western Blot检测方法使用不同荧光基团标记的二抗，即可同时检测磷酸化蛋白水平和该蛋白的总水平，因为无需进行剥离及再孵育，缩短了磷酸化蛋白检测的时间，实现了高效便捷的磷酸化蛋白水平和该蛋白的总水平检测，同时蛋白定量更为准确。 3. LICORbio Odyssey还能实现高通量Western Blot检测，称为In-Cell Western，其具有广泛的应用领域，包括药物筛选、细胞信号通路研究、病毒感染研究、疾病研究、药物治疗效果评估以及基础细胞生物学研究等诸多领域。更重要的是，它还是美国药典官方推荐的胰岛素检测技术。这种多功能性和权威认可，使In-Cell Western技术成为了现代生物医学研究和药物开发中的不可或缺的工具。 4、 LICORbio Odyssey系统是期刊杂志推荐的定量Western Blot检测平台，基于荧光的检测方式，可以获得稳定的定量检测数据，并且具有6logs宽广的动态范围，在检测到弱信号的同时强信号不会过曝，可以实现准确定量的蛋白表达检测。 了解更多，请扫码添加微信↑ 参考文献 Kofoed, C., Erkalo, G., Tay, N.E.S. et al. Programmable protein ligation on cell surfaces. Nature 645, 793–800 (2025). https://doi.org/10.1038/s41586-025-09287-2
