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告别繁琐培养步骤、无惧细菌形态多样——QUANTOM Tx™革新细菌检测效率!
Introduction NEW ” 细菌量化是许多领域中最基本的测量方法之一,包括医疗保健,农业、粮食生产和工业。从需要准确定量益生菌中的活干酪乳杆菌、热杀菌疫苗中的霍乱弧菌、用于废物处理的硫氧化菌、测定土壤中的一般细菌水平污染,或者只是实验室中标准的细胞悬浮液,细菌计数是一个基本但重要的步骤。本文比较三种常见细菌检测定量方法与一种快速自动化解决方案。
常见细胞计数方法 菌落计数 通过菌落形成单位(CFU)计数是常用方法。该法操作简单,能反映细胞活性,对低浓度细菌敏感。但其局限性在于:依赖培养基和培养条件;仅适用于可培养细菌(排除VBNC菌株);需数日获得估算结果(单菌落可能源自1-1000个细胞);结果受操作人员和技术影响。对食品/水污染等时效性检测而言,耗时是其显著缺点。 细胞计数板计数 专用计数板(Petroff-Hausser和Levy计数室)可在显微镜下直接计数细菌。这种金标准方法快速简便,但存在操作强度大、人为误差显著的问题。细菌尺寸微小导致:某些菌种镜下难辨识;细胞在计数室内移动;多层分布使焦点难以追踪——这些因素均影响计数的准确性和可重复性。 流式细胞术 这是目前最精确的总细胞/活细胞计数方法之一。但其操作和数据分析需专业培训,且关键缺陷在于:无法区分单细胞与细胞团(每个颗粒均被记为单一事件),导致链状杆菌或成簇球菌无法被识别为单个细胞。 QUANTOM TX 微生物细胞计数器 本设备是基于成像的自动化细胞计数器,可在数分钟内识别并计数单个细菌细胞。QUANTOM TX通过自动对焦、捕获和分析荧光染色细胞的多幅图像,实现高灵敏精准检测。其先进的细胞识别与解聚算法能精确分辨紧密簇中的单个细胞。配合两种染色方案,可分别计数总细胞或活细胞。 混合细胞、染料、buffer,加到细胞计数板内 将计数板放入离心机中,通过离心使得细菌均匀的分布在同一层面 将计数板插入计数仪中,一键计数 查看和导出数据 计数准确性验证 QUANTOM Tx对标准微珠的准确计数验证 采用已知浓度荧光微珠验证计数准确性:微珠梯度稀释后与Cell Loading Buffer I混合,注入QUANTOM M50计数玻片,经QUANTOM离心机(300 RCF,10分钟)离心实现均匀分布。三次重复实验显示(图1),设备计数结果与理论浓度高度吻合(R²=0.9997)。 图1.已知标准珠浓度与QUANTOM Tx结果之间的相关性。 对比流式细胞仪/计数板的准确性与变异度 流式细胞仪:噻唑橙染色,FACSCalibur检测(BD Biosciences),标准微珠辅助定标 计数板:Petroff-Hausser计数板(20μm, Hausser Scientific),CELENA S数字成像系统(Logos Biosystems)配合20x物镜成像,计数5个Neubauer网格 QUANTOM Tx:总菌染色kit染色并计数。 参数:LED=5,尺寸=0.3-50μm,检测灵敏度=0,解聚等级=0,圆度=0% 结果显示(图2):总浓度无显著差异,但计数板数计数据随浓度升高变异性增大,QUANTOM Tx与流式细胞仪结果一致性更佳。 图2. QUANTOM Tx、流式细胞仪和血细胞计计数结果的比较。 可调protocol检测多形态细菌 为验证设备通用性,采用QUANTOM总菌染色试剂计数多种细菌。QUANTOM Tx每次自动捕获、分析并标记多达20幅高清图像,便于目视复核。 示例如下: 干酪乳杆菌:LED=5,尺寸=1-50μm,检测灵敏度=0,去团化等级=7,圆度=0 巨大芽孢杆菌:LED=5,尺寸=1-50μm,检测灵敏度=3,去团化等级=10,圆度=0 如图3所示,设备成功识别紧密杆菌链中的单个细胞: 图3. 使用 QUANTOM Tx 去团化功能检测到的链状单个杆菌乳酸杆菌(Lactobacillus casei)(和巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)分别在去聚类水平设置为 7 和 10 的情况下用 QUANTOM Tx 进行计数。 结论 细菌是一类极其多样化的生物,其形态、大小和排列方式多种多样,这使得自动细胞计数成为一项颇具挑战性的任务。普遍使用的菌落计数法耗时且不可靠,充其量只是一种粗略的估计。即使是流式细胞仪,也会将单个或成簇的每个颗粒都记录为一个事件。细胞计数板耗时且容易受到操作者之间差异的影响。QUANTOM Tx 微生物细胞计数器是一种有效、准确且快速的量化不同形态和排列方式细菌的方法。这使得 QUANTOM Tx 成为即时、实时评估样本中细菌数量的重要且必要的工具。 QUANTOM Tx验证菌种(部分): Logos 细胞成像系产品列 CELENA S 数字成像系统 CELENA®S数码成像系统是一款台式多合一数字成像仪,使得采集可供发表的高质量荧光、明场以及相差图像变得轻而易举。用户友好界面的软件兼容了诸多图像应用例如图像采集、分析、活细胞成像、Z轴层叠成像以及自动细胞计数功能。点击查看更多介绍。 CELENA X 自动化成像系统 CELENA®X成像系统拥有基于图像和激光的自动对焦模块,以及全电动的XYZ移动载物台,大大简化了多孔板扫描以及切片扫描的时间。无论简单的固定细胞分析还是复杂的、延时活细胞分析,强大而灵活的软件都可以让你建立高级图像分析程序,用来定量分析固定细胞和活细胞的特征。CELENA®X是药物发现与生命科学研究的有利工具。数字化成像时代:解锁高效细胞显微成像 Logos 细胞计数仪系列 LUNA III LUNA III是一款基于明场成像的细胞计数仪,主要应用于细胞系的计数和活性检测。 详细信息可点击下方链接查看:LUNA-III™ 自动细胞计数仪——重新定义精准与效率 LUNA FL LUNA FL是一款兼具明场和荧光场成像的细胞计数仪,可用于细胞系、原代细胞、干细胞、PBMC、酵母等细胞计数和活性检测,还可用于转染GFP细胞的转染效率检测。 详细信息可点击下方链接查看:我是你的眼——多功能细胞计数仪 Luna FL LUNA BX7/FX7 LUNA FX7是一款兼具明场和荧光场成像的8通道细胞计数仪,可以进行生物工艺监控,也可通过选配软件实现审计追踪的功能。 详细信息可点击下方链接查看:LUNA-FX7™高通量自动化双荧光细胞计数仪免费试用啦~ QUANTOM Tx QUANTOM Tx细菌计数仪主要用于细菌的自动化计数和活性检测。可用于革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。 详细信息可点击下方链接查看:自动细菌计数仪想了解一下吗? 如果您对以上产品感兴趣,欢迎扫描左侧二维码添加工作人员企业微信咨询。
基因有限公司为韩国Logos Biosystems中国地区合作伙伴,负责其细胞成像和细胞计数产品的售前咨询、售后安装、应用培训和维修维护等服务。如果您想了解更多产品信息请扫描以上二维码或直接联系您身边的“基因人”。
关于基因 基因有限公司成立于1992年,是一家提供生命科学科研仪器、试剂耗材和技术服务的综合服务商。基于“Gene Brightens Every Life • BioTech Connects the World”——“基因燃亮生命 • 生物技术连接世界”的愿景,专注于生命科学领域前沿技术的引进和推广,致力于推动该领域国内科研机构硬件水平及实验方案的革新与升级。同时,公司也一直致力于自主品牌的科研设备的研发与生产,拥有一系列通用性强、互补性高的自主品牌产品。 基因的服务网络遍及全国各地十多个大中城市,拥有包括仪器销售,试剂销售,市场与技术支持,维修,客服,物流等多个部门组成的完整服务体系。 我们希望通过不懈努力,为您的成功铺路搭桥,也为中国的生命科学事业赶超世界先进水平尽一己之力。欲了解更多信息,请访问www.genecompany.cn。