细胞培养是生物学和医学领域中广泛使用的实验技术，各位老师同学们也都非常熟悉。但进行细胞培养时可能会遇到各种问题，比如反反复复出现的微生物污染，严重影响实验效果，导致实验进度大大延后。。。那么常见的微生物污染类型有哪些呢？1、细菌污染
细菌污染特点为污染速度快，易被发现。细菌污染后，培养基1-2天就会变浑浊，对细胞生长影响明显，pH 值改变。常见细菌种类为大肠杆菌、枯草杆菌、假单胞菌等( 革兰阴性菌) 葡萄球菌等( 革兰阳性菌)，其中革兰阳性菌较为多见，利用此特点可指导抗生素的应用。污染主要来源实验室环境、实验人员( 实验服) 、实验用具等。污染后的镜下特点为: 胞浆出现大量颗粒，细胞变圆或崩溃，从壁上脱落，污染较轻时可见小菌体在细胞间运动。2、霉菌污染
霉菌污染特点为短期内不会引起培养液的浑浊，可在培养液中形成白色或黄色漂浮物。污染的主要来源为实验人员( 实验服) 。污染后的镜下特点为: 低倍镜下可见乳白色的团状漂浮物，培养液无变化; 高倍镜下可见明显的菌丝，细胞活力变差，生长速度明显变慢，甚至死亡。3、支原体污染
支原体污染的特点为短期无变化，具有隐蔽性。它们可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常的感觉。如果继续使用这种已被支原体污染而貌似正常的细胞做试验或生产，将会严重影响结果。污染的主要来源为血清。污染后镜下特点: 在光镜下常可见到细胞核及胞浆内出现大小不等的颗粒或空泡。4、病毒污染
病毒污染特点是极为隐蔽，很难用常规的方法检测到。受病毒污染的细胞液通常清亮无变化。污染分为外源性和内源性，污染的主要来源为细胞系，常见于杂交瘤细胞。大多数受病毒污染的细胞不会产生形态变化及细胞病理现象，少部分病毒会造成细胞变圆、肿胀，脱落。5、黑胶虫污染
黑蛟虫是一种生物还是非生物，学术界还有争论。其污染特点为开始对细胞无影响，当数量达到一定程度时就会对细胞产生影响。受黑蛟虫污染的细胞液通常清亮无变化。污染主要来源于血清，400倍显微镜下可见点状或片状游动小体。6、细胞交叉污染
细胞的交叉污染一般来自细胞建株和细胞传代过程中两种或两种以上细胞之间的污染。镜下可发现细胞的形态发生改变，与正常该细胞株的形态不同。
为避免以上提到的污染，在实验操作中要多加注意，一定要使用彻底消毒过的实验器皿及培养介质，培养细胞时也要使用适合的抗生素，更关键的要保证无菌的实验操作环境！生物安全柜主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器(HEPA过滤器)过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。普通II级A2型生物安全柜只能做到单层HEPA过滤，仅能有效过滤99.995%的0.3μm颗粒，效率较低。Mars Pro 1200在普通II级A2型生物安全柜基础上，在操作台下方新增一排H14 HEPA过滤器，使外界空气首先进入操作台下方主过滤器进行首次过滤，再通过上方HEPA过滤器进行二次过滤，双重过滤系统，能有效过滤99.99999975% 0.3μm颗粒，更高效过滤细菌、支原体、病毒、霉菌等污染微生物。提供比普通II级生物安全柜更高安全级别保护，更有效防止实验过程中出现微生物污染。
Mars Pro 1200操作台下方主HEPA过滤器内置4组12个“微生物捕获阱”，所有病原微生物将通过操作台下方“微生物捕获阱”被捕获，从而得到洁净的气流，再经过上方两个H14 HEPA过滤器二次过滤后提供更高安全等级的下降和外排的气流保护操作者、样品、和环境。
独特的“微生物捕获阱”也便于后期的收集、处理和销毁，防止微生物散播和逃逸。微生物直接捕获在主HEPA过滤器中，安全柜内腔的通风管道、风扇、及上方HEPA过滤器无污染，方便后期仪器维护。
可以在安全柜运行状态下更换操作台下方主HEPA过滤器，在负压环境中，仅需将操作台下方过滤器封口，按照袋进袋出的方式，安全移除，后续进行焚烧等处理。
细胞房和实验室的空气消毒对减少实验污染也有关键作用。AirCln150紫外空气消毒机已获得卫健委“消字号”认证，使用高能量UVC紫外灯，对空气及气溶胶进行彻底消杀，防止病原微生物传播和逸散。其采用双层H14级HEPA四合一复合滤网有效过滤空气中0.3μm及以上微粒,如病毒、细菌、气溶胶、PM2.5等，净化效率高达99.98%。滤网中的活性炭层还可有效吸附甲醛等致癌物，保持实验室内空气安全、清新。特殊的滤网自消毒技术，在需要更换滤网时提醒，并对滤网进行紫外消杀，有效防止二次污染，维护更安全。
参考文献：[1]陈思瑶,吴亚猛,张琳娜等.细胞培养过程中常见的微生物污染及处理方法[J].吉林医药学院学报,2016,37(01):47-50.DOI:10.13845/j.cnki.issn1673-2995.2016.01.020.
