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解码浪漫密码:PacBio HiFi测序帮助破译首个玫瑰染色体水平基因组

版权所有,转载请联系基因市场部
2022-02-14

2月14日,西方国家的情人节,现已成为全世界著名的浪漫节日。象征着爱、美丽、热情、奉献、智慧和永恒的玫瑰,自然是节日礼物的首选。

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但痴情的男士们,只关注玫瑰花色和数量,可能可以博女神一笑;如果能够熟练而优雅地款款道出玫瑰的商用价值和玫瑰基因组密码,哇哦,相信我,女神会对你刮目相看,暗生情愫。


下方教程,拿走不谢~

玫瑰(Rosa rugosa原产于东亚,分类上属蔷薇目蔷薇科蔷薇属玫瑰种。玫瑰属于落叶灌木,枝杆多刺,奇数羽状复叶,小叶5-9片,椭圆形,有边刺。玫瑰花瓣倒卵形,重瓣至半重瓣,花有紫红色、黄色、粉色、白色和各种复色,夏季和初秋开花,结红色扁球形可食用果实。

玫瑰有多种商用价值。因其迷人的粉红色花朵,经常被用来作为防风林和树篱,在北美和欧洲也被种植作为引进的观赏植物;因其果实中酚类,类黄酮化合物以及抗坏血酸含量高,具有抗氧化活性和抗菌活性等药用价值;因其花朵中含有令人愉悦的挥发性化合物,主要用于提炼玫瑰精油,玫瑰精油应用于化妆品、食品、精细化工等工业用途。由于玫瑰极强的适应能力,可以适应干旱、盐碱地、高温高湿地区,因此具有良好的生态价值,对于改良月季、蔷薇等品种的抗性具有较高的育种价值。然而,由于缺乏玫瑰的基因组信息,玫瑰的产学研还处于初级阶段,限制了玫瑰育种的改良。


南京农业大学园艺学院程宗明教授和陈飞等人Horticulture Research上发表了题为A chromosome-levelgenome assembly of rugged rose (Rosa rugosa)provides insights into its evolution, ecology, and floral characteristics的研究论文,破译了首个玫瑰植物的基因组,达到了高质量染色体的组装水平,为该植物的遗传研究和分子育种提供了图谱,揭示了玫瑰耐盐、耐旱等的分子遗传基础。

基因组测序与组装:

该研究以玫瑰成熟叶片作为测序材料,使用了包括PacBio HiFi测序技术、10X Genomics和 Hi-C 在内的测序技术共同构建玫瑰的参考基因组,具体测序数据如下表1。其中使用PacBio HiFi测序获得了59.24Gb的原始数据,同二代测序数据纠错后,获得组装基因组为382.64 Mb,Contig N50为15.36 Mb,与同为蔷薇科的月季(R. chinensis)、草莓(Fragaria vesca)等基因组相比,该玫瑰基因组序列质量高、完整度好,序列具有高可信度。

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应用Hi-C测序技术将 98.21% 的序列锚定到7条染色体上(如下图1),获得了高质量的7条玫瑰染色体序列。

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图1 R. rugosa Hi-C 相互作用热图显示Contigs 组装成7条染色体


基因组成分分析:

PacBio HiFi测序兼顾长度长和高准确度,无碱基偏好性的均一性覆盖度,能更好地对基因组中高GC含量序列或重复序列进行检测。R. rugosa基因组由50.27%的重复序列组成(表 2)。这些重复序列中的大多数是长末端重复序列 (LTR),包括Gypsy和Copia,占全基因组的26.75%R. rugosa中LTR的比例远大于草莓属中的比例,但略低于月季(R. chinensis),表明LTR在蔷薇科植物中的快速进化。

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通过分析其基因组编码39,704个蛋白质编码基因,使用GO、KEGG和COG数据库分别注释了37.32%、87.58%和23.03%的基因,将基因和重复元素映射到 7 条染色体(图 2)。

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图 2 R. rugosa高质量基因组组装和基因组细节可视化。A: 7条染色体;B:基因密度(窗口大小 = 50 kb);C:LTR 密度(窗口大小 = 50 kb);D:GC含量分布(窗口大小 = 50 kb);E:共线性分析


基因组进化分析:

这项研究首次为玫瑰研究提供了基因组宝贵资源。通过分析R. rugosa的基因组序列和比较基因组分析,从三个主要角度为玫瑰的生物学、生态学和进化提供了新的见解。

从结构基因组学的角度来看,基于对玫瑰和其他蔷薇科基因组的比较分析,研究发现在月季(R. chinensis)中发现了一个独特的10.44Mb大片段倒置,并在草莓中发现了WGT后事件引起1.56Mb片段的易位,如下图3。这些结果表明,蔷薇属内的基因组在同线性方面非常保守,小的遗传变化可能导致形态变异。

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图3 使用几种真双子叶植物进行跨物种比较,包括葡萄 (V. vinifera)、玫瑰(R.rugosa)、月季(R. chinensis)、草莓 (F. vesca) 和桃 (P. persica)。红线表示使用葡萄作为外群在这些蔷薇科物种中进行基因组重排


从花生物学的角度来看,发现玫瑰基因组中保留的 MADS-box基因比月季中更多,这表明该基因在玫瑰花发育中的潜在作用。

从应激生物学的角度来看,发现许多胁迫相关的转录因子DREB2A-INTERACTING PROTEIN 2(DRIP2)和肽转运蛋白 3(PTR3)在玫瑰中特异性扩增和保留,可能有助于其适应应激环境。

总之,R. rugosa 的高质量基因组序列数据为玫瑰的遗传研究和分子育种提供了图谱基础。基于PacBio HiFi的快速高质量基因组组装优势,还可以进一步进行比较基因组,泛基因组的相关研究,为玫瑰家族的丰富和深入研究带来更多的可能。


文章链接https://www.nature.com/articles/s41438-021-00594-z


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● 在 PAG 2020会议的一次演讲中,Genetwister Technologies 的 Bart Nijland 解释了他的团队如何着手对高度复杂的四倍体玫瑰 Rosa x hybrida L. 基因组进行单倍型感知组装,以捕获其全部遗传变异。从 PacBio 的 Sequel II 系统生成的 HiFi 读取使得从植物的许多亲本基因中解析出关键信息成为可能。


具体内容,可戳下方视频了解。




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基因有限公司作为PacBio公司在中国区的独家代理商,自2011年以来将PacBio第三代单分子实时测序技术引入国内,一直为国内用户提供专业的三代测序系统的安装培训,技术支持,应用培训与售后维护工作,赢得客户的一致好评与信任。基因有限公司将一如既往的支持越来越多的PacBio用户。




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