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Bullet Blender助力抗击COVID-19

版权所有,转载请联系基因市场部
2021-11-17

德国弗里德里希·勒夫勒研究院Martin Beer等研究人员合作发现,SARS-CoV-2刺突蛋白的D614G突变可增强病毒的复制和传播。这一研究成果于2021年2月26日在线发表在国际学术期刊《自然》上。

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研究人员构建了等位基因SARS-CoV-2变体,并证明S(D614G)突变:1.与人宿主细胞表面受体血管紧张素转化酶2(ACE2)的结合增强;2.在原代人类支气管和组织、鼻气道上皮培养物以及新型人类ACE2敲入小鼠模型中的复制增加;3.在SARS-CoV-2感染的仓鼠和雪貂模型中复制和传播能力显著提高。

这些数据表明,尽管刺突蛋白中D614G突变导致病毒体外结合和复制的细微增加,但它在体内形成了真正的竞争优势,解释了当前流行的 SARS-CoV-2 病毒中为何S(D614G) 变体在全球处主导地位。


文中,为比较两种病毒SARS-CoV-2D614 和 SARS-CoV-2G614 在 hACE2 敲入小鼠模型中的复制情况,在病毒感染第 2 天和第 4 天收集组织样本:肺右上叶、右鼻甲、右嗅球、部分右脑半球、右肾根尖部分和远端小肠(回肠)部分于RA1裂解缓冲液中,使用Bullet Blender高效组织细胞破碎仪匀浆上述组织样本,18000g离心3min收集上清液使用NucleoMag VET试剂盒(Macherey Nagel)提取组织样本中总RNA(含病毒RNA),使用Nanodrop分析RNA纯度反转录定量PCR技术确认各组织中病毒载量(结果见下图)。

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在接种后第 2 天和第 4 天收集的组织样本显示,鼻甲、肺和嗅球中的病毒载量较高,而大脑中的病毒载量较低。脾脏、小肠、肾脏和粪便中的病毒 RNA 水平低至检测不到(数据未显示)。

RNA病毒基因组稳定性差,变异性高,易降解,所以在样本制备时保持RNA生物大分子的活性至关重要。为何Bullet Blender组织细胞破碎仪能担此重任,助力提取病毒RNA呢?

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采用击打技术,转头以每分钟几千次的频率击打样品管,样品、研磨珠发生剧烈震荡,样品匀浆更彻底。


样本实现彻底匀浆,提高生物大分子的得率。


单次处理多达24个样品,多种组织样品可单次处理完成,节省时间。


独立封闭式匀浆操作,避免样品间交叉污染。


空气制冷,保证生物大分子完整性。


除了动物组织外,还可处理植物组织、细菌、酵母、真菌、孢子等样品类型,用途广泛。


如果该款仪器也能帮助到您,或想获得更多产品信息和资料可添加以下技术人员。

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