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如何提高蛋白电泳分辨率?
SDS-PAGE凝胶电泳
聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE),是目前对蛋白质进行分离、纯化鉴定及分子量测定的主要方法之一。十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子去垢剂,可与蛋白质结合,使蛋白质变性并带上大量负电荷,消除各蛋白自身的电荷差异。因而电泳的迁移速率主要取决于蛋白分子量大小。 SDS-PAGE通常采用不连续电泳系统,即用上层胶(浓缩胶)和下层胶(分离胶)两种不同浓度的凝胶灌制,通过其电荷效应、浓缩效应和分子筛效应,达到蛋白质高分辨率的分离效果。 So,如何提高蛋白电泳分辨率? TIPS ● 保证聚丙烯酰胺充分聚合,可提高凝胶的分辨率。配制凝胶在室温凝固后,可在室温放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置,前者易导致凝固不充分,后者可导致SDS结晶。 ● 根据待测蛋白的分子量大小,配置合适浓度的凝胶,可参考下图。 ● 使用长胶电泳效果更好,使较大分子量的蛋白质也能实现更好地分离。 #01 高分辨率 115×130mm或115×100mm两种大凝胶尺寸可选,能够更加准确分离分子量接近的相邻蛋白条带。 #02检测通量高 上样和电泳最多可同时做48个样品。 #03 槽体坚固抗摔 采用优质原料一次注塑成型,抗摔坚固。 #04 原位制胶 斜凸轮制胶器配合原位灌胶技术,避免玻璃板二次移动。 #05 可外接冷却循环器 可外接循环水浴,避免电泳出现“微笑”条带。 扫描二维码获得更多信息 基因有限公司官网: www.genecompany.com