技术交流
扫描二维码
或添加“GeneGroup003”
获取更多更新资讯
商城订购
扫描二维码
或添加“基因商城（GeneMart）”
手机下单，快人一步
售后服务
扫描二维码
或添加“GeneGroup005”
获取更快速售后支持
2小时可得到长达200Kbp的核酸，看看如何实现的吧？
PacBio Sequel II试剂更新至2.0版本，平均读长提高了50％，HiFi文库的插入片段长度提升至15-20Kb，从而更好的支持基因组从头组装。对于好多的测序者来说，怎样得到顺应三代长读长测序的核酸？
很多三代测序核酸抽提者不得不依赖于酚:氯仿提取法、盐析法、核分离-琼脂糖包埋法或者通过使用各种硅胶膜试剂盒和磁珠法试剂来进行DNA提取。
盐析法在提供高分子量DNA的同时，存在最重要的问题是纯度。由于缺乏柱膜纯化，提取出来的DNA往往有大量的污染物和抑制剂组份。盐析过程往往是冗长和耗时的。
酚:氯仿萃取物含有有毒试剂，需要特殊的废物处理。
硅胶膜和基于磁珠的纯化方法最重要的问题是DNA的完整性。离心力(硅胶膜提取方法)和频繁的吸液和混合(磁珠法)对DNA产生显著的剪切作用。因此，硅胶膜和磁珠纯化的DNA很少超过30 kbp，并且含有单链缺口，降低了HMW应用。
核分离-琼脂糖包埋法效果不错。但是这个提取方法对技术的要求比较高，还需要后期的大片段核酸回复系统，对于一般的实验者来说很难实现的。此外这个方法的过程也很繁琐，大约需要1-2天的时间来完成大片段的制备。
——《方法论》
还有一种核酸纯化方法，集万千宠幸于一身。
NucleoBond® HMW DNA kit
裂解液重力过柱，无需离心，减少了离心力对核酸的破碎作用，尽量保证核酸原生态，最长片段可达200kbp。
采用了阴离子交换色谱技术，对核酸下游应用有抑制作用的组分均被清除，核酸纯度较高。
相比以往的核酸抽提产品，这款产品几乎通吃所有的样本类型，并且允许更大的上样量，比如300mg微生物样本（革兰氏阴性阳性菌、酵母）、1.5g植物组织、300mg动物组织、2ml血液、107细胞等。
包括裂解的时间，整个提取过程2h。
总结：
试剂盒纯化出的核酸，顺其自然的满足长读长测序技术（如SMRT）和long‑range short‑read测序方法（如Linked-Reads数据的10X Genomics）。这款试剂盒也就成了基因组测序、基因组组装和基因簇克隆的合适选择。
 | 试剂盒操作流程： |  |
 对于较难提取的样本，这款试剂盒兼容NucleoSpin® Bead Tubes，进行样本的更充分匀浆；还兼容裂解前各种商业化酶。DNA 完整性要求高的时候，可以使用异丙醇沉淀DNA的方法提取；也可以使用NucleoSnap® Finishers 或 NucleoSpin® Finishers让DNA更快的脱盐和浓缩。 | ||
| 应用数据： | |
大片段 官方结果：  DNA来自研磨方法匀浆的植物样本 Brassica sp.，使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。提取后的DNA在 Femto Pulse 系统上面分析。如图所示，在117218 bp检测到主峰，最长片段可达200000 bp。 | ||
客户demo结果：
DNA来自植物样本黄褐棉样品，使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。如图所示，在164251 bp检测到主峰，最长片段可达200000 bp。
更长的subread
通过酶裂解的方式从HeLa细胞中纯化DNA，然后在PacBio RS II上进行Single Molecule Real Time (SMRT)测序分析。使用NucleoBond® HMW DNA (MN)提取的核酸和使用Q品牌 (kit P 和 kit M)试剂盒提取的核酸相比。
适用不同的样本类型并且得率和纯度较高
除了核酸的完整性，纯度和得率对于HMW DNA测序的影响也非常大。NucleoBond® HMW DNA 试剂盒提取不同的样本，得率对于测序试验已足够， 吸光度比值A260/A280 > 1.75 和A260/A230 > 2.00，表明样本纯度也很高。
客户demo结果：
DNA来自植物样本黄褐棉样品，使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。
想试试这个NucleoBond® HMW DNA kit吗？
请扫描下方的二维码。
基因有限公司作为MACHEREY-NAGEL的全国一级代理，可为您提供针对不同类型样本，例如血液、组织细胞、植物、真菌、土壤、粪便等的DNA和RNA核酸抽提解决方案。详细产品资料可留言或联系身边基因人。
