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拒绝金属离子脱落，无需繁琐再生，新型镍柱，你值得拥有！

2020-10-26

镍柱,你只知道NTA和IDA?

以下内容预计会花费您3分钟，请滑动拇指了解吧

为了克服传统镍柱的金属离子脱落，提高对螯合剂和还原剂的耐受程度，一款新型的镍离子亲和层析填料贴心上市。

精品推荐

可耐受20 mM EDTA螯合剂和 20 mM DTT还原剂，免去样本前处理

Ni²⁺离子结合牢固，脱落微乎其微

无需繁琐的再生步骤，可直接进行NaOH清洗

DBC高达40mg/ml

重复性高，产物纯度高

可预装，可散装

His-Tag标签在重组蛋白质的表达、鉴定和纯化中，无疑是广泛被应用和偏爱的一款标签，小小六个组氨酸标签极大得方便了重组蛋白质的检测和纯化，成为了蛋白质研究和蛋白质工程的有力工具。His-Tag重组蛋白的纯化常使用金属离子螯合层析，又称固定化金属离子亲合层析（Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC），最早由Porath等人提出后，因为其快速方便的纯化效果，迅速成为了His-Tag重组蛋白的主流纯化手段。

传统的IMAC纯化填料最常用两种配基：次氮基三乙酸（NTA）和亚氨基二乙酸(IDA)。通常情况下IMAC是比较稳定的，但螯合剂和还原剂会导致其金属离子脱落。细胞培养，尤其是CHO或者昆虫细胞等真核细胞培养过程中，通常会加入EDTA等螯合剂。另外也有研究表明例如E.coli 在某些高压情况下会产生高特异性的金属螯合剂，导致 His-Tag 融合蛋白纯化的纯度和产量大大降低；DTT（二硫苏糖醇）是一种还原剂，可保护蛋白质的游离巯基不被氧化，但它可还原IMAC琼脂糖的金属离子，通常会使琼脂糖的颜色变为棕色。因此在使用以上两种传统的IMAC填料进行纯化 His-Tag 融合蛋白的实验之前，通常需要提前进行缓冲液的置换来去除螯合剂或者还原剂。

因此，为了克服传统填料的金属离子脱落，提高对螯合剂和还原剂的耐受程度，一款新型的镍离子亲和层析填料贴心上市。

WorkBeads™ NiMAC 可耐受20 mM EDTA和 DTT，无需去除样本中螯合剂和还原剂

在上样样本以及缓冲系统中包含20 mM EDTA和 20 mM DTT的情况下，WorkBeads™NiMAC 和普通Ni-NTA 镍柱纯化结果相比，更加耐受螯合剂和还原剂，产物回收率大大提高。

Ni²⁺离子脱落微乎其微

在上样样本以及缓冲系统中包含20 mM EDTA和 20 mM DTT的情况下，WorkBeads™NiMAC 和普通Ni-NTA 镍柱上样前后的颜色比较，可看出，WorkBeads™NiMAC更加耐受螯合剂和还原剂，Ni²⁺离子的脱落微乎其微，而Ni-NTA在同样条件下，颜色变淡，Ni²⁺离子脱落明显。

NiMAC无需繁琐的再生步骤

动态结合载量高达40mg/ml

蛋白表达量低也不怕，NiMAC可实现大体积样本纯化

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