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转染效率快速评估选它——LUNA FL全自动细胞计数仪
转染是指将外来遗传物质引入真核细胞的过程。目前，虽然已经开发了许多转染方法，但是无论使用哪种方法，转染效率都达不到100％。尽管可以通过构建稳定转染细胞株的的方法缓解该问题，但是前期瞬时转染的转染效率的差异是比较大的。为了比较从不同实验获得的结果，研究人员需要在每次进行瞬时转染时确定转染效率。一种简单而流行的评估转染效率的方法是使用GFP报告基因，通过检测GFP蛋白的表达来评估目的基因的表达。
Luna FL全自动细胞计数仪可简单、快速的进行GFP转染效率的评估。它整合了用于明场和荧光场检测的光学模块，将荧光显微技术与图像分析软件相结合，不仅支持台盼兰染色/非染色的明场计数，还支持荧光场如AO/PI染料的细胞计数和活性检测，酵母细胞的计数和活性检测，还可进行GFP转染效率的评估。
用Luna FL测定GFP转染效率，首先需要分析阴性对照样品，阴性对照可以是未转染的对照或模拟转染的对照。通过该步骤，测量细胞系的背景荧光。接下来，分析实验样品，发出比背景强度强的荧光的细胞被认为是“阳性的转染细胞”。使用Luna FL进行GFP转染效率评估有众多的优点：价格合理，不需要专门培训，不需要专门的操作员，仪器无需维护，准确性高，以及适用于更具有挑战性的样品检测。
接下来我们看一下它是如何进行转染效率评估吧？ 步骤一：样品制备、加样 先将10µL阳性样品加到芯片样品孔中。 步骤二：打开Luna FL电源、插入芯片 将芯片完全插入芯片槽，静置10sec-1min，确保细胞沉降下来，所有细胞不再移动。 步骤三：调节曝光强度 将阳性细胞样品加到样品孔中，选择 “GFP Transfection Assay” 选项，出现预览视野，预览为明场视野，在2x或4x下进行焦距调节；点击 “Bright Field” 切换到荧光GFP预览模式，调节曝光水平，哺乳动物细胞一般为18，可根据样品进行调节。 步骤四：设置阴性对照 插入阴性对照的样品，然后点击“Set-Control”，弹出下图对话框，点击OK，大约30sec时间，阴性对照分析结束，点击OK。 步骤五：检测GFP阳性细胞样品 插入 GFP-transfected 样品，点击 “Count Sample” ，大约30sec时间，样品检测结束，给出数据，如果想要继续检测样品，点击“Next Count”即可。 步骤六：结果查看、保存 点击“Image”，可查看明场、荧光场、是否Tag图片； 点击“Graph/Gating”查看细胞检测结果； 点击“Save/Print”进行结果保存，可保存PDF、图片、CSV多种格式的文件。 LUNA FL全自动细胞计数仪小结 Ø 具备明场和双荧光通道 Ø 激发光源：470±20nmLED，检测通道：525±20nm,600LP,适用于常见的细胞活性检测染料对，如AO/PI,FDA/PI等 Ø 更适合于PBMC、原代细胞、干细胞、酵母等组分复杂或者较小尺寸细胞的分析 Ø 可用于GFP转染效率的评估 Ø 自动液体透镜聚焦：操作简单、无磨损、响应快、聚焦稳定 Ø 大视野成像：数据更具统计学意义 Ø 去团化分析：计数更准确 Ø 机载计算机：无需外接电脑，节约空间 Ø 可重复使用玻片：节约使用成本 Ø 可输出：5MP图片、PDF、CSV数据 LUNA细胞计数仪荣获2019年金奖 在该严格的评级标准下，来自韩国Logos Biosystems公司的LUNA自动细胞计数仪获得SelectScience®质量奖章的金奖，在172位用户的评分中得到了平均4.7分的好成绩，受到了广大的科研工作者的一致好评，为您选择细胞计数仪提供有力的参考。 欲了解更多关于Logos Biosystems 自动细胞计数仪的信息，欢迎扫描下方微信二维码与我们技术人员一对一在线联系或联系您身边的基因有限公司员工，即日起可以申请免费试用哦！
