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BHQ双标记探针提升qPCR检测信噪比

版权所有,转载请联系基因市场部
2020-03-11







在上一篇“qPCR实验中的隐藏绝招:Quencher 淬灭剂”中,带大家了解了什么是淬灭剂,不同淬灭剂之间的区别,以及神一样存在的“黑暗淬灭剂BHQ” 是怎么做到“黑暗淬灭”的。小编对于BHQ的崇拜之情真是无以言表了。


BHQ---真正的黑洞淬灭剂,Biosearch技术,qPCR及SNP分型的福音




BHQ淬灭剂,可称为名副其实的“黑暗淬灭剂”,它们本身没有天然荧光,有助于减低背景信号,提升信噪比。该淬灭剂就像一个黑洞,能够将一定距离内荧光基团发出的光全部吸收,真正实现对荧光信号的100%淬灭。同时,BHQ在可见光谱中具有比其他黑暗淬灭剂如Dabcyl更宽的吸收范围 ,能够抑制多种荧光团产生的信号而又不影响背景荧光,从而能够进行高度多重的核酸测定。


BHQ 430nm到730nm近红外光区前所未有的荧光淬灭光谱





不同类型的BHQ Probes




针对不同程度疑难序列和适用性不同,双标记BHQ探针分为三类:



三种BHQ探针设计策略示例图:

三种BHQ探针设计策略示例图


红色:BHQnova探针    黑色:标准末端淬灭探针

探针长度为35 bases时BHQnova探针在qPCR中的扩增曲线(图中显示的是未扣除本底的原始数据),BHQnova探针能显著降低背景信号,提高荧光信噪比(S:N)


设计合成BHQ双标记探针,欢迎联系我们



在了解了BHQ以及BHQ双标记探针之后,这里再教下大家如何有效地选择适合的染料和淬灭剂配对:

选择正确的BHQ染料的重要考虑因素之一是确保选择的吸收剂荧光报告分子更匹配的淬灭剂。LGC, Biosearch Technologies提供了染料选择表光谱叠加工具来帮助您做出更佳选择:多重荧光定量PCR探针设计也完全不用担心 ,真正做到省心、省钱、省时间!



Spectral Overlay Tool 




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Biosearch Technologies----荧光引物/探针设计与合成的全球领导者

 

Biosearch Technologies是专业性荧光定量PCR探针合成及标记服务公司,提供与世界上各种荧光定量PCR仪配套的探针标记方式及荧光素。


创始人Ron Cook及诺贝尔得主Kary MullisPCR发明者)共同发明了Biosearch SAM I寡核苷酸合成器,合成了世界上首个PCR引物。 Real-time PCR于上世纪90年代出现后,Biosearch的科学家们先后研发了被业界视为标准的Black Hole Quencher®BHQ)黑洞淬灭剂及的CALFluor®Quasar® 系列染料。

 

Biosearch拥有丰富的高品质产品线,不仅包括探针和引物产品,广泛应用于药物研发,基因组测序/SNP检测/基因表达分析等领域,也为其他寡核苷酸生产厂商提供核酸合成原材料。包括多种荧光染料和淬灭染料BHQ、具有高表面积电位的CPG支持载体和合成柱、用于寡核苷酸合成和色谱应用的化学活化的多孔玻璃,以及合成及纯化配件等。


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