MMI激光显微切割系统在空间转录组研究中的杰出贡献想必您还记忆尤新，是否仍感叹于它的单细胞切割精度，受益于它的高收集效率，沉浸于它流畅的使用体验呢！殊不知，它还有更多、更大的本事来帮助科学家们做高端深入的研究！

MMI激光显微切割系统不仅可以完成单细胞切割的任务，还可以助力DNA损伤&修复的研究，接下来我们一起来领略一下它的别样风采吧！！！

DNA损伤

DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变，并导致遗传特征改变的现象，包括双链断裂、点突变、插入、缺失、倒位等等多种情况。细胞在生长和增殖过程中不断受到各种类型的DNA损伤的挑战，这些损伤可导致基因组不稳定，这也是肿瘤发生发展过程的一个重要标志。而更危险的DNA损伤是DNA双链断裂(double strand breaks, DSB)，因为它会导致染色体的重排，对单倍体细胞而言，一个双链断裂就是致死性事件。

DNA损伤修复

外界环境和生物体内部的因素都经常会导致DNA分子的损伤或改变，而且与RNA及蛋白质可以在细胞内大量合成不同，如果DNA的损伤或遗传信息的改变不能更正，对体细胞就可能影响其功能或生存，对生殖细胞则可能影响到后代。所以在进化过程中生物细胞所获得的修复DNA损伤的能力就显得十分重要，也是生物能保持遗传稳定性之所在。

CellCut Plus助力DNA双链断裂修复研究

发表于 Molecular Cell 上的这篇题为“The Mismatch-Binding Factor MutSβ Can Mediate ATR Activation in Response to DNA Double-Strand Breaks”的文章，作者利用MMI的CellCut Plus 激光显微切割系统对U2OS和HEK293细胞系进行激光照射后造成DNA损伤，确定在DNA损伤位点发挥作用的相关蛋白并进一步探索这些蛋白在DNA双链断裂修复过程如何发挥作用，解密ATR激活过程。

作者利用MMI CellCut Plus系统355nm高频低能固态紫外激光器对细胞进行激光照射，激光速度、聚焦和强度设置分别为50%，搭配高步进精度载物台，高效完成对细胞染色体损伤处理。通过免疫荧光染色发现，MMR蛋白MSH2、MSH3和MSH6在细胞核体内DNA损伤位点迅速积累，表明这些蛋白是在DSB位点发挥作用。而且，相比之下，MSH2或MSH3缺失的细胞发生I-SceI诱导的HR（Homologous Recombination）修复事件的频率明显降低，而缺失MSH6对U2OS和HEK293细胞系的HR修复效率均无显著影响。

MMR蛋白被招募到DNA损伤位点

SiRNA技术介导HEK293和U2OS细胞中HR修复效率的改变

利用SiRNA技术对MMR蛋白的具体功能进一步研究发现MutSβ（MSH2-MSH3）促进ATR激活以响应DSB。RPA2在Ser33上的磷酸化是ATR激活的特征，而ATR激活是DSB修复所需要的过程，而MSH3或者MSH2的缺失，使得RPA2Ser33的磷酸化大量降低。MutSβ与持续存于RPA-ssDNA中的发夹结构结合并与ATR和ATRIP形成复合物，促进ATRIP与RPA-ssDNA的结合，从而导致TOPBP1激活ATR (Kumagai et al., 2006; Zou and Elledge, 2003)。

Kumagai, A., Lee, J., Yoo, H.Y., and Dunphy, W.G. (2006). TopBP1 activates the ATR-ATRIP complex. Cell 124, 943–955.

 MutSβ在ATR激活过程中的作用模型

DNA损伤修复是在多种蛋白和作用因子的共同作用下完成，对其修复过程的研究有助于了解基因突变的机制，揭示衰老和癌变的原因。借助MMI CellCut Plus系统可以轻松实现对细胞的定点定量损伤，帮你实现对DNA损伤修复的精准研究，解密DNA损伤修复过程中的信号传导通路。

德国Molecular Machine & Industries (MMI)是专门致力于将显微操作技术与高精度激光技术相结合应用于生命科学领域的一家专业公司，其标志性产品MMI CellCut激光显微切割系统和CellEctor单细胞分选系统成为目前世界上性能更优异的样本处理系统。基因有限公司作为一家专业性的生命科学仪器、试剂供应商，自1992年成立以来一直秉承着“Let Professionals Serve Professionals”的宗旨，力求将更先进的技术方法推荐到国内，为广大客户提供包括技术咨询、产品选配、售后培训及维护的专业服务体系，并作为MMI全国性代理商，可为感兴趣的客户提供专业的产品咨询、技术答疑及联系试用等，欢迎大家前来咨询。