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一天之内,获得单细胞单拷贝水平的RNA FISH结果!
随着近年来转录组研究迅猛,以及高水平杂志对数据准确性的要求越来越高,要确定前期筛选靶标的表达量、分子功能及作用机制,必须经过原位的验证。对靶基因进行组织学水平或者细胞学水平的单分子RNA 原位杂交可以实现对研究对象的精准原位定量。越来越多的研究者采用RNA FISH,除了是对传统蛋白水平IHC/IF和DNA 水平DNA FISH原位验证的有力补充,StellarisTM RNA FISH由于不受抗体的限制,在肿瘤、病毒、神经疾病、植物、微生物及特殊物种研究领域有着独特的优势,且对于时下热门的lncRNA、miRNA、cirRNA等不表达蛋白的非编码RNA,也是绝佳的选择。
StellarisTM RNA FISH---单分子水平的RNA原位、多重、定量技术 传统的RNA原位杂交技术局限于灵敏度、特异性不高,而大部分RNA在细胞中的拷贝数都很少,所以高灵敏度的原位杂交技术就显得尤其关键。此外,传统的比如地高辛的方法,实验操作上也很繁琐耗时,通常需要五天左右的时间。而StellarisTM RNA FISH技术不仅可以达到单细胞单拷贝级别灵敏度,而且操作简单快速,仅需一步杂交,一天内即可完成单分子RNA FISH检测! 一步法杂交 Stellaris RNA FISH 通过48 个荧光标记的probe与同一条靶标RNA在半连续的位置结合;每条RNA结合多根荧光probe之后,在普通宽场显微镜下形成一个独立的光斑(衍射极限),通过观察光斑位置及个数,即可完成单分子水平的RNA定位及定量。仅需一步杂交,即可完成smFISH检测。 Biosearch Technologies 提供免费的在线探针设计软件,针对目标RNA 设计更佳的Stellaris RNA FISH 探针组。同时,针对常见RNA序列,我们也提供DesignReady探针组,其经过专业的设计以及严格的生物信息学分析以确保其特异性。 在线设计链接 在线探针设计软件 https://www.biosearchtech.com/support/tools/design-software/stellaris-probe-designer DesignReady探针组 https://www.biosearchtech.com/products/rna-fish/designready-stellaris-probe-sets 快点击查看您的基因是否是DesignReady! 可能有人会问,Stellaris探针如何保证特异性? 更低的假阴性:针对靶标基因设计25-48条探针,这样的设计方法可以使假阴性降到更低,因为即使有部分mRNA降解或者被结合RNA的蛋白阻碍,仍然还会有大部分充足的探针会结合到靶基因上。 更低的假阳性:只有当10个以上的探针聚集在一起时才能观测到荧光信号,即使有部分脱靶的探针也会非常弱,也会造成荧光信号的弥散而远远低于靶基因的信号。 Stellaris RNA FISH单分子荧光原位杂交的优势 传统的RNA原位杂交技术除了灵敏度受限,还不能做多重,无法定量,操作上也比较耗时和复杂,Stellaris RNA FISH单分子荧光原位杂交却很好的解决了这些问题。 灵敏度高:可检测单细胞、单拷贝RNA分子 特异性好:多组探针设计,潜在脱靶效应或少数RNA降解可忽略,有效避免假阳性 操作简单:无抗体抗原结合的繁琐步骤;一天即可得到结果 适用性广:无物种限制(植物、动物、微生物等);无样本限制(细胞、组织、石蜡切片(FFPE)、全组织…) 探针设计灵活,荧光标记灵活 多重共定位:多靶点RNA共定位;RNA与蛋白共定位;寡核苷酸探针与其它原位技术兼容性好 简便,快速,开放的实验体系: 仪器和试剂开放,无需特殊仪器与配套试剂,可自行配置试剂,也可购买其优化的杂交与洗涤Buffer。 请访问Citation Center 网站获取完整的文献列表信息。 https://www.biosearchtech.com/support/resources/stellaris-citation-center 想发高分文章,想要漂亮的图片,怎能少了Stellaris单分子荧光原位杂交! 联系我们,获取完整版中文技术手册 更多应用报道详情请点击: 利用Stellaris smFISH原位杂交揭示多分体病毒侵染机制 Nature Communications: 利用单分子荧光原位杂交揭示LncRNA调控植物春化作用机制 我与高分文章的距离只差一张Stellaris RNA FISH图片! 肿瘤单细胞转录异质性研究//搜索您的目标 RNA FISH探针 基因有限公司为LGC Biosearch授权一级代理,想进一步了解Stellaris RNA FISH技术及更详细的产品信息,敬请留言或直接联系基因有限公司。
单分子RNA FISH,荧光原位杂交新时代