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PacBio SMRT测序又一力作——《Nature》刊登高质量向日葵基因组组装结果

版权所有,转载请联系基因市场部
2017-06-13

前言

 

       向日葵是一种世界通用的油料作物,即使在极端环境,例如干旱的情况下,也能保证稳定的产量。可见,这一物种具有非常强的适应气候变化的能力。鉴于其重要的油料价值和经济地位,向日葵一直以来都被包括加拿大、法国等国家列为测序研究中的重大项目。但由于向日葵基因组主要由长的、高度相似的重复序列组成,这十几年来,向日葵基因组的极端复杂性对前沿的测序技术提出了巨大的挑战,更终通过长读长的PacBio SMRT测序技术得以解决。

       2017年5月,顶级杂志Nature上发表了向日葵更新的高质量基因组组装结果。作者采用了PacBio RS II平台,对自交系XRQ基因型的向日葵进行了测序,共消耗了407个 SMRT cell,从3200万个长reads中拼接得到了13957个contig,contig N50为399kb,共组装得到了3Gb的基因组数据,占预估基因组大小的80%。通过序列分析,构建了17条染色体,定位了97%的序列信息。

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图1:整合了遗传学,多样性以及基因表达数据的向日葵基因组组装图。


      经过对基因组组装结果的分析,发现向日葵基因组中超过75%的序列为长末端重复逆转录转座子(Long Terminal Repeat Retrotransposons,LTR-RTs)。并且,在向日葵的基因组中,LTR-RTs以非随机的模式分别。因此对于复杂结构的向日葵基因组,用NGS数据进行组装,往往难以得到理想的结果。

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图2:每个染色体1 Mbp的基因密度

5.jpg图3:每个染色体1 Mbp中DNA转座子的密度

       在此之前,研究人员们也得到了另一个基因型HA412的NGS数据。针对当时所采用的Roche 454和illumina两个平台,建立了从200bp到40kb片段大小不等的多个文库。分别经过组装以后发现,运用Roche 454平台,组装得到了3.1Gb的基因组数据,占基因组总长的86%,但scaffold N50仅为25kb;另一平台illumina,则组装得到了1.2Gb的基因组数据,仅占基因组大小的33%,并且scaffold N50仅为21kb。

       综合454和illumina两个平台,对数据进行了整合,通过31392个超级scaffold进行组装,得到了HA412的2.04Gb的基因组数据。

 

       在进一步的研究中,作者还基于基因组组装的结果,比较了莴笋、朝鲜蓟、葡萄、咖啡的基因组,以评估了菊科植物的演化史。并且,还运用GWAS、QTL方法重构了花期和油脂代谢这两大育种性状的遗传网络,找到了新的候选基因。这一高质量的向日葵基因组组装结果,将为农业生产、人类营养学、生物多样性等研究领域带来新的启示。


原文链接:

http://www.nature.com/nature/journal/vaop/ncurrent/abs/nature22380.html#supplementary-information


基因有限公司作为Pacific Biosciences公司在中国区的独家代理商,自2011年以来将PacBio第三代单分子实时测序技术引入国内,一直为国内用户提供专业的三代测序系统的安装培训,技术支持,应用培训与售后维护工作,赢得客户的一致好评与信任。基因有限公司将一如既往的支持越来越多的PacBio用户。




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