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深度解析：CD3、CD4、CD8 的流式实验关键点（附：本期促销）
对流式细胞术研究者而言，CD3、CD4、CD8 作为T细胞的核心表面标志物，可谓再熟悉不过。然而，在实际操作中，你是否也曾遇到这样的困惑：“CD3 和 CD3ε 的抗体究竟有何不同，该如何选择？”、“样本刺激后CD4+细胞数量异常下降，是哪里出了问题？”、“抗CD8与抗CD8α抗体在使用中有何区别？”如果你对这些问题感到棘手，那么本文将为你一一梳理。 CD3 与 CD3ε：识别位点不同，标记效果相当 CD3是T细胞表面的关键跨膜蛋白，与TCR共同组成TCR-CD3复合体，负责抗原识别与信号转导。该复合体包含四条肽链：CD3ε、CD3δ、CD3γ和CD3ζ，通常以二聚体形式（γε、δε、ζζ）存在。CD3ε、δ、γ位于胞外区，而CD3ζ则位于胞内。 T细胞结构示意图 普通CD3单克隆抗体可识别CD3γ、δ或ε中任一肽链的表位，而CD3ε抗体则特异性针对ε链。尽管识别区域不同，两者在流式实验中均能有效标记T细胞。因此，在实际应用中，选择抗CD3或抗CD3ε抗体均可达到理想的检测效果。 CD4+ T细胞检测中的“内吞”现象及对策 T细胞发育过程 CD4+ T细胞（辅助性T细胞）包括Th1、Th2、Th17、Treg等多个功能亚群，其在静息状态下细胞因子分泌水平极低，需经刺激（如PMA + Ionomycin）后才能有效检测。但值得注意的是，PMA刺激会引发CD4膜蛋白发生内吞，导致细胞表面CD4信号显著减弱甚至消失，影响流式分析。 若遇到此类情况，可尝试以下策略： 1、采用破膜后胞内染色检测CD4，并注意选择适用的抗体克隆； 2、优先选用受内吞影响较小的抗体克隆型，具体可参考文献支持； 3、选择荧光强度高、信噪比好的染料，如PE、APC，避免使用FITC或PerCP等易受干扰的染料； 4、通过CD3与CD8反向设门鉴定CD4+群体（即CD3+CD8-细胞视为CD4+ T细胞），该方法适用于CD4-CD8-群体比例较低的样本。 CD8与CD8α：异同解析与应用场景 CD8分子以二聚体形式存在，主要包括CD8αα和CD8αβ两种类型，不存在CD8ββ二聚体。人外周血中多数CD8+ T细胞表达的是αβ异源二聚体，而NK细胞及部分γδ T细胞则表达αα同源二聚体，如下图所示： 普通CD8抗体可识别α链或β链，而CD8α抗体则特异性结合α链。在大多数情况下，两者可互换使用。但若需明确区分传统T细胞与NK细胞或γδ T细胞中的CD8表达，则推荐使用CD8β抗体，以提高特异性。 基因GENE4Abio相关产品列表 抗体： 试剂盒： 试剂盒验证数据介绍和特价活动： 开学狂欢活动：金秋九月，科研正当时：高效实验与资源规划指南 ¥ Sale 降 如您对以上任意内容感兴趣，可扫码添加您的专属产品顾问，基因有限公司将以专业与热忱，为您提供最优质的服务！
