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PI、DAPI、Hoechst...谁是最强细胞核"荧光侦探"？
流式迷宫寻真相，荧光镜下追蛛丝——当细胞世界的“谜案”亟待破解，选派哪位“荧光侦探”出马，直接决定您的“证据链”是否可靠！面对PI、7-AAD、Hoechst 33342、DAPI、Fixable Viability Dye 510这五位“探案专家”，摸清各自的核心技能，正是您赢得实验成败的第一步！ 本文将为您清晰梳理这五种“探案专家”的【核心技能库】与【专属案件领域】，供您在处理“细胞任务”时精准点兵！ （线人密报：据说还有一位专攻“细胞分身奇案”的追踪大师CFSE…但本次行动档案已满，它的秘密只能留待下次任务揭晓！） 这五位“探案专家”主要服务于两大“细胞任务”： 区分细胞死活 (细胞活力检测) 目的：精准识别样本中的死细胞并加以排除，因为它们会产生非特异性结合，干扰后续分析（如抗体染色、功能检测）。这对流式细胞术等实验的准确性至关重要。 适用染料：PI (碘化丙啶)、7-AAD (7-氨基放线菌素D)、Fixable Viability Dye 510 (可固定死活染料510)。 标记细胞核 (核染色) 目的：清晰显示细胞核的位置和形态，用于细胞计数、定位（如判断蛋白是否在核内）、细胞周期分析（DNA含量测定）或特殊分选（如侧群细胞SP）。 适用染料：Hoechst 33342、DAPI (4',6-二脒基-2-苯基吲哚)。 死细胞无处遁形，细胞核清晰现形——在细胞世界的“探案行动”中，PI、7-AAD、FVD 510、Hoechst 33342与DAPI五位“荧光侦探”各怀绝技！谁是最强王牌？关键要看您交给它们的“任务档案”！ PI (碘化丙啶) 主要用途：死细胞鉴别（细胞活力检测）。 工作原理：结合核酸（DNA/RNA），但无法进入活细胞，只染膜破损的死细胞。 优点：经济实惠，信号强，操作简便快速。 关键注意点：仅适用于新鲜、未固定的细胞样本！ 固定后所有细胞均会被染色，失去区分死活的能力。其发射光谱较宽，在多色流式实验中可能干扰邻近的红色荧光通道（如PE-Cy5）。 7-AAD 主要用途：死细胞鉴别（细胞活力检测），尤其推荐用于多色流式实验。 工作原理：与PI类似，结合DNA，不进入活细胞，特异性标记死细胞。 优点：发射波长比PI更长（~647nm），在流式实验中显著减少与常用荧光素（如FITC, PE, APC）的光谱重叠，兼容性更好，是多色分析的优选死细胞染料。 关键注意点：同样仅限新鲜未固定样本使用！ 固定后失效。成本通常略高于PI。 Fixable Viability Dye 510 (FVD 510) 主要用途：死细胞鉴别，且兼容后续固定和透膜操作。 革命性原理：含有活性基团，能与细胞内的游离氨基共价结合。死细胞因膜破损，染料大量进入胞内结合，信号强；活细胞仅表面少量结合，信号弱。共价键确保染色后固定和透膜处理不会丢失死活信号。 优点：解决了传统死活染料（PI, 7-AAD）的最大局限，是进行胞内因子（如细胞因子）或核内蛋白（如转录因子）检测实验时，区分死活细胞的金标准。有多种发射波长可选（510nm是常用选项，对应FITC通道），便于多色搭配。 关键注意点：使用时需要优化浓度和孵育条件。成本相对较高，但对关键实验价值显著。 以基因生物的产品为例看下它的出色表现 Hoechst 33342 主要用途：细胞核染色。 工作原理：结合DNA，能够被动扩散进入活细胞进行核染色。 优点：适用于活细胞核染色，是进行活细胞成像、侧群细胞（SP）分析的标准染料。 关键注意点：需要紫外光（UV）激发，并非所有流式细胞仪或显微镜都配备相应光源。主要用途是核染色，虽然染色强度可能间接反映细胞状态，但并非专门设计用于精确区分死活。 DAPI 主要用途：细胞核染色（主要用于固定后的样本）。 工作原理：高亲和力结合DNA，但不能穿透活细胞的完整细胞膜。 优点：对固定透膜后的细胞核染色效果极佳，特异性强，背景低，非常稳定且经济。是免疫荧光（IF）、免疫组化（IHC）中最常用的核复染剂。 关键注意点：必须对细胞进行固定和透膜处理后才能有效染色。同样需要紫外光激发。 “ 如何选择？快速指南 附：基因生物产品列表 通晓五大“神探”的核心差异——关键在于识破他们的【专攻案件类型】（区分细胞活力 or 标记细胞核）、【潜入条件】（活细胞/死细胞/固定现场）及【信号装备】（光谱特征）——便是您拿下“细胞谜案”的决定性筹码！ 请根据您的“任务简报”（实验目标+样本状态），精准调度匹配的侦探出战。一旦锁定最佳人选，立即扫码联络基因有限公司【探案智囊团】——我们将为您火速派遣专家，配备顶级破案装备，助您直捣证据核心！ 行动暗号丨扫码添加您的专属案件指挥官 总部徽章丨基因有限公司
