您是否曾在PCR实验中饱受非特异性条带的困扰？是否想用更“聪明”的方法提升实验成功率？今天带您认识常见PCR优化方法——Touch-down PCR。
问题：常规PCR中，若退火温度设置不当，引物容易与非目标DNA结合，导致非特异性扩增（如杂带、引物二聚体）。
解决方案：Touch-down PCR在前几个循环中，将退火温度设定为高于引物的理论最佳温度（Tm值）（例如：若引物Tm值为60°C，则初始退火设为65°C）。
效果：只有结合能力最强（即与目标DNA完全匹配）的引物才能“过关”，其他结合力弱的引物被“淘汰”，大幅减少错误产物的生成。
程序图示：
面对高GC含量、复杂二级结构的模板时，普通PCR易失败，Touch-down PCR通过精准控温可突破扩增瓶颈。
多对引物同时反应易出现引物二聚体，梯度降温能有效减少非特异性结合，提高多靶点检出率。
在稀有突变检测（如癌症基因筛查）中，高特异性可避免假阳性，结果更可靠。
⚠️ 温度降落幅度不宜过大，易导致后期扩增效率下降
⚠️ 当模板浓度过低时建议先进行预扩增
工欲善其事，必先利其器。想要完美实现温度梯度控制，一台具备精准温控的PCR仪必不可少！
TC100采用6个独立的加热模板，每个模块有独立加热和冷却能力，可精准设置 6个不同的温度梯度，相比传统的梯度模式更加准确，减少摸索PCR反应的退火时间。
可精准设置6个不同温度梯度，可准确摸索PCR退火温度；
温度递增递减功能，可用于Touch-down PCR实验；
可在6重不同的温度下进行样品孵育；
可同时运行6种不同Tm值引物；
可用于Long -PCR实验，扩增高达5kb的片段；
可用于巢式PCR实验。
若您对BG-TC100梯度PCR仪感兴趣，可以联系技术人员咨询或申请试用。
