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考马斯亮蓝染色考马斯亮蓝染色(Coomassie Brilliant Blue staining)是一种在实验室中广泛使用的蛋白质染色方法,主要用于在聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对分离的蛋白质进行可视化。在实验室中,考马斯亮蓝染色因其快速、简便、低成本和高重现性而被广泛使用。实验原理考马斯亮蓝染色的原理基于染料与蛋白质之间的相互作用。染料分子带有负电荷,与蛋白质中的疏水氨基酸残基及SDS处理后的负电荷区域结合,形成蓝色复合物。这种结合主要通过电荷相互作用、疏水相互作用以及氢键和范德华力实现。染色过程中,考马斯亮蓝染料与蛋白质紧密结合,使得蛋白质条带在凝胶上清晰可见,便于后续的分析和定量。实验简要步骤①凝胶准备:准备蛋白质样品的SDS-PAGE电泳。②染色前处理:用去离子水冲洗凝胶去除SDS和电泳缓冲液。若凝胶上有琼脂糖也需去除。③染色液准备:通常配方为0.1% Coomassie Brilliant Blue G-250在50%甲醇和10%冰醋酸的溶液中。④染色:将凝胶浸入染色液中,摇床震荡确保凝胶与染色液充分接触。染色时间可以从30分钟到几小时不等,具体取决于蛋白质的量和染色液的浓度。⑤染色增强(可选):为了增强染色效果,可以将染色后的凝胶在染色液中加热,例如在微波炉中加热30秒到1分钟。⑥脱色:染色完成后用脱色液(通常为10%甲醇和7%冰醋酸的溶液)替换染色液进行脱色,直到背景清晰,蛋白质条带明显。⑦存储凝胶:如果需要,可以将成像后的凝胶保存在脱色液中,以防止染料进一步扩散。⑧注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备,如手套和护目镜,因为染色液和脱色液可能对皮肤和眼睛有刺激性。考染胶成像脱色完成后,可以使用百晶G520M和Eagle Chemi多功能成像分析系统,得到高质量考染胶图!!考染胶成像结果展示Eagle Chemi配置网页不知道您的实验应用应该选购哪款Eagle Chemi?可在百晶官网(www.baygenebiotech.com.cn)→售后服务→Eagle Chemi型号配置中,输入您的应用需求,得到适合您的型号。联系我们想要了解更多详情?请联系我们的技术人员获得更多信息。
考马斯亮蓝染色
实验原理
实验简要步骤
①凝胶准备:
准备蛋白质样品的SDS-PAGE电泳。
②染色前处理:
用去离子水冲洗凝胶去除SDS和电泳缓冲液。若凝胶上有琼脂糖也需去除。
③染色液准备:
通常配方为0.1% Coomassie Brilliant Blue G-250在50%甲醇和10%冰醋酸的溶液中。
④染色:
将凝胶浸入染色液中,摇床震荡确保凝胶与染色液充分接触。染色时间可以从30分钟到几小时不等,具体取决于蛋白质的量和染色液的浓度。
⑤染色增强(可选):
为了增强染色效果,可以将染色后的凝胶在染色液中加热,例如在微波炉中加热30秒到1分钟。
⑥脱色:
染色完成后用脱色液(通常为10%甲醇和7%冰醋酸的溶液)替换染色液进行脱色,直到背景清晰,蛋白质条带明显。
⑦存储凝胶:
如果需要,可以将成像后的凝胶保存在脱色液中,以防止染料进一步扩散。
⑧注意事项
操作时应穿戴适当的个人防护装备,如手套和护目镜,因为染色液和脱色液可能对皮肤和眼睛有刺激性。
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