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微量苯酚无处逃，NanoDrop省心妙！
核酸｜质控
在这个后基因组时代，核酸的定量仍然是现代实验室使用的一项基本技术。大多数生物学研究都涉及核酸样本的实验技术和工作流程，例如PCR、qPCR、二代测序、克隆等实验技术要求研究人员在下游实验中使用核酸样品之前，必须确定样品纯度以及其他影响核酸样品的重要变量。
酚氯仿抽提法是经典的DNA提取方法，若操作不当会导致苯酚残留在DNA样品中，所以开展下游实验之前，确定核酸样品的浓度、纯度和质量是非常重要的。
Acclaro智能样本检测技术
纯度一直是评估紫外吸收污染物存在的主要方法，通常研究人员会评估其比值是否在可接受的范围内(表1)。
表1：TE缓冲液中纯核酸样品普遍接受的纯度范围。请注意，纯苯酚的纯度与纯核酸的纯度相差不大。
然而，仅依靠纯度并不能完全地评估核酸样品中潜在的污染物(例如苯酚)，而NanoDrop One/OneC超微量分光光度计内置Acclaro智能样本检测技术，不仅可以鉴定污染物类型还可以提供扣污染之后的校正浓度。
图2:Acclaro功能识别样品中可能存在的污染物。2A)测量屏幕:Acclaro污染物图标表示在dsDNA样本中检测到潜在污染物。2B)污染物分析屏幕:对比原始吸收光谱(DNA +苯酚，蓝色)、校正光谱(已扣除污染物，绿色)和污染物光谱(橙色)。此屏幕还包含原始和校正的DNA浓度结果。
DNA样品中的酚污染实验
制备双链DNA溶液（鲑鱼精子DNA，浓度225ng/ul），通过添加不同量的DNA和苯酚原液制备成9种混合物，如表2所示
表2:dsDNA和苯酚原液混合得到上述样品。
使用TE做空白对照，每种混合物溶液在NanoDrop One上进行5次重复测量，每次上样1.5µL。dsDNA应用程序计算浓度(原始-未校正和校正)并提供污染物识别数据，如表3所示。
表3:使用dsDNA应用测定种混合物的DNA浓度。混合物3至9的校正DNA浓度直接从Acclaro污染物分析屏幕上获得。Acclaro污染物图标表示混合物的酚污染水平触发Acclaro的检测结果
表3给出了从表2中描述的9种DNA/苯酚混合物中获得的Acclaro污染物数据，请注意，苯酚成分是以百万分之一(ppm)表示的。
当苯酚污染大于18.75 ppm时，即可触发Acclaro功能，灵敏度非常高。Acclaro智能样本检测技术可以识别苯酚污染、扣除污染并给出更准确的校正浓度。
图3:绘制了每种dsDNA/苯酚混合物的平均纯度。其中红线为260/230，蓝线为260/280。
图3表明，苯酚污染的增加对A260/280和A260/230比值的影响都非常小。苯酚污染为600 ppm的DNA样本，其A260/280比值为1.71，A260/230比值为2.08；这些值在可接受的纯核酸样品的范围内。然而，在这种苯酚污染水平下，DNA浓度的结果通常相差两倍以上。
总结
传统上，研究人员依赖A260/280和A260/230比值作为核酸溶液中污染物存在的指示。虽然纯度可以指示某些污染物的存在，但不能鉴定污染物类型和浓度。
NanoDrop One/OneC超微量分光光度计内置的Acclaro智能样本检测技术可以分析样本中的污染物，通过校正给出真实的样本浓度，让样本检测真正的步入智能分析时代。
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基因与Thermo
基因有限公司自2004年成为Thermo Fisher公司在中国区的合作伙伴，至今有近20年的合作历史，负责NanoDrop全系列产品线的售前咨询、售后安装、应用培训和维修维护等服务。目前在中国有数万台装机，服务了几十万用户。
关于基因 基因有限公司成立于1992年，是一家提供生命科学科研仪器、试剂耗材和技术服务的综合服务商。基于“Gene Brightens Every Life • BioTech Connects the World”——“基因燃亮生命 • 生物技术连接世界”的愿景，专注于生命科学领域前沿技术的引进和推广，致力于推动该领域国内科研机构硬件水平及实验方案的革新与升级。同时，公司也一直致力于自主品牌的科研设备的研发与生产，拥有一系列通用性强、互补性高的自主品牌产品。 基因的服务网络遍及全国各地十多个大中城市，拥有包括仪器销售，试剂销售，市场与技术支持，维修，客服，物流等多个部门组成的完整服务体系。 我们希望通过不懈努力，为您的成功铺路搭桥，也为中国的生命科学事业赶超世界先进水平尽一己之力。欲了解更多信息，请访问www.genecompany.cn。
