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NEB@了你 | 快来看ta如何玩转DNA组装与无缝克隆！
「无缝克隆」是一种新型克隆解决方案，它突破了很多现有克隆方法的局限，可在质粒的任何位点进行一个或多个目的DNA片段的插入，此过程没有序列依赖性且可实现无缝组装。
无缝克隆可有序组装多个片段，组装不受序列限制且不引入额外序列，这为合成生物学工作提供了强大的技术支撑，如克隆整个代谢操控子或全基因组重建。
今天让我们再次回顾下明星产品之一：
NEBuilder® HiFi DNA Assembly （NEBuilder® 高保真 DNA 组装）
NEBuilder®高保真DNA组装基于Gibson无缝组装原理，并在其基础上进行了优化，可实现精准的DNA片段连接。试剂盒通过使用新型高保真聚合酶来实现简单快速的无缝克隆，是合成生物学的绝佳利器。
PART 01 选择NEBuilder®的 4大理由：
1.省时： 15分钟内完成简单快速的无缝克隆。 2.便捷： 可用于“标准长度”片段和大片段的组装，片段最多可达11个。 3.兼容： 可直接进行下游实验，DNA直接用于转化或者作为PCR或RCA的模板。 4.适用性强： 适用于各种DNA改造，包括定点突变。
PART 02 NEBuilder®HiFi DNA 组装克隆方法：
PART 03 NEBuilder®适用于 多种组装方案：
PART 04 工具： NEBuilder®组装工具 可用于根据输入的片段序列和用于扩增的聚合酶，为您NEBuilder®HiFi DNA组装或Gibson组装®反应设计引物。
PART 05 来看实例！
NEBuilder®高保真DNA组装提高4个片段组装反应的效率：
使用NEBuilder®高保真DNA组装预混液、GeneArt®****混合液（A品牌）和In-Fusion®****组装预混液（B品牌），组装具有20bp重叠的四个片段（约20fmol），构建 pUC19载体。在50℃下进行组装反应，反应时间为60分钟或15分钟。将2μl的每种组装后的混合物转化到NEB 5-alpha E.coli感受态细胞（NEB#C2987）中，并涂布到含IPTG和X-Gal的LB/Amp平板上。统计代表正确组装的蓝色菌落数（>总菌落的95%）。 NEBuilder®高保真DNA组装预混液得到的菌落数多于两种竞品。
产品信息
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