技术交流
扫描二维码
或添加“GeneGroup003”
获取更多更新资讯
商城订购
扫描二维码
或添加“基因商城(GeneMart)”
手机下单,快人一步
售后服务
扫描二维码
或添加“GeneGroup005”
获取更快速售后支持
最长片段可达200 kbp!看ta如何2小时完成DNA抽提
目前三代测序客户常用的核酸纯化方法有酚-氯仿提取法、盐析法、核分离-琼脂糖包埋法,以及通过使用硅胶膜试剂盒和磁珠法来进行DNA提取,但以上这些方法都有比较明显的缺点。
1. 酚-氯仿提取法:萃取物含有有毒试剂,需要特殊的废物处理。 2. 盐析法:由于缺少柱膜纯化,提取的DNA往往有大量的污染物和抑制剂组份,盐析过程往往是冗长且耗时的。 3. 核分离-琼脂糖包埋法:对操作的要求比较高,对于一般的实验者来说很难实现的。并且过程繁琐,大约需要1-2天的时间来完成大片段的制备。 4. 硅胶膜试剂盒和磁珠法:最重要的问题是DNA的完整性。离心力(硅胶膜提取方法)和频繁的吸液与混合(磁珠法)会对DNA产生显著的剪切作用。因此,硅胶膜和磁珠法纯化得到的DNA很少超过30 kbp,并且含有单链缺口,降低了HMW应用。
还有一种基于阴离子交换色谱法的
核酸纯化方法:
NucleoBond® HMW DNA试剂盒
片段长,最长可达200Kbp: 裂解液重力过柱,无需离心,减少了离心力对核酸的破碎作用,尽量保证核酸原生态,最长片段可达200 kbp。 纯度高: 采用了阴离子交换色谱技术,对核酸下游应用有抑制作用的组分均被清除,核酸纯度较高。 样本类型广: 相比以往的核酸抽提产品,这款试剂盒可以覆盖大多数样本类型,并且允许更大的上样量,比如1.5 g植物组织、300 mg微生物样本(革兰氏阴性/阳性菌、酵母菌)、300 mg动物组织、2 ml血液/体液、107个细胞(酶裂解法)等。 速度快: 包括30 min的裂解时间在内,整个提取过程2 h。
此外,阴离子交换技术能够实现高纯度和抑制剂去除。这使得 NucleoBond® HMW DNA 试剂盒成为常用的long-read测序技术(如SMRT 和 Nanopore)以及long-range short-read测序方法(如 Next GEM(10× Genomics))的理想选择。
—— 操作流程 ——
如果对DNA 完整性要求较高,可以使用异丙醇沉淀DNA的方法提取,也可以使用NucleoSnap® Finishers 或 NucleoSpin® Finishers使DNA更快的脱盐和浓缩。
一起来看NucleoBond® HMW DNA 试剂盒 的出色表现!
1 「 大片段DNA 」
通过机械裂解从某植物样本中纯化得到的DNA大片段后,在Femto Pulse系统可检测到高达200 kbp 的片段,在117218 bp检测到主峰,证明了 NucleoBond® HMW DNA 试剂盒提取和纯化高分子量 DNA 的能力。
客户测试结果:
DNA来自植物样本黄褐棉,使用NucleoBond® HMW DNA 试剂盒进行核酸纯化。如图所示,在164251 bp检测到主峰,最长片段可达200 kbp。 2 「 更长的subread 」
通过酶裂解的方式从HeLa细胞中纯化DNA,并在PacBio RS Ⅱ上进行SMRT测序分析,与Q品牌的两款常用产品 (试剂盒P 和试剂盒M)相比,可以看出NucleoBond® HMW DNA 试剂盒(MN)可以得到更高的subread平均长度,从而实现更好的测序结果。
3 「 适用不同的样本类型, 且得率和纯度较高 」
客户测试结果:
DNA来自植物样本黄褐棉,使用NucleoBond® HMW DNA 试剂盒进行核酸纯化。
—— 产品信息 ——
基因有限公司作为德国MN品牌全国一级代理,为您提供针对不同类型样本的核酸抽提解决方案。 如果您对这款产品感兴趣, 欢迎添加MN产品专员了解更多信息!