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in vivo-jetRNA®+,100%mRNA包装能力,仅需两步即可实现高效率活体转染!
随着基因干扰技术的发展,越来越多的研究需要将核酸递送到更自然的体内环境,进行体内基因功能研究。目前病毒载体的递送效率比较高,但会引起一定的免疫反应,且生产周期较长,成本较高。今天小编给大家介绍一款适用于任何动物模型,两步即可实现活体转染的非病毒载体核酸转染试剂。
(源于Polyplus)
Polyplus拥有近20年的转染经验,其基于阳离子聚合物的转染试剂,具有天然低毒、高效及便利性。体内传递mRNA的转染试剂—in vivo-jetRNA®+ 可通过全身或局部注射递送至多种器官,且递送mRNA仅需两个步骤,可用于抗癌研究、CRISPR/Cas基因编辑及蛋白替换等领域。
高效性
in vivo-jetRNA®+由于其内在特性,能保护其有效荷载免受核酸内切酶的降解,防止与蛋白质的非特异性相互作用,进而提高进入细胞的效率。测试结果显示,其具有100%的mRNA包装能力(见图A),产生的递送效率可与目前疫苗开发金标准的脂质纳米颗粒相媲美(见图B)。
mRNA递送效率(源于Polyplus)
A.使用凝胶电泳(agarose gel)分析 mRNA alone (lane 1) 和被in vivo-jetRNA® +包裹的mRNA (lane 2) B.编码Luciferase的mRNA使用 in vivo-jetRNA®+或Dlin-MC3-DMA LNP 通过尾静脉注射进小鼠,注射后24小时分析Luciferase的表达。
省时性
In vivo-jetRNA®+为即用型试剂,不需要制剂设备,使用方便,并提供经优化的protocol,mRNA/in vivo-jetRNA®复合物溶液制备只需2步,15分钟内即可注射到动物体内。
使用流程(源于Polyplus)
稳定性
In vivo-jetRNA®+具有出色的稳定性。在室温或4°C,In vivo-jetRNA®+脂质体大小可以稳定长达一个月 (见下图A);在低浓度或高浓度的mRNA条件下,均具有稳定的脂质体大小 (见下图B)。
不通温度不同浓度下的稳定性效果
(源于Polyplus)
A.50 μg/ml mRNA条件下,in vivo-jetRNA®+的脂质体大小,在室温或4°C储存15分钟, 1周,2周,3周和4周后使用动态光散射 (DLS)进行检测。B.不同mRNA浓度下 ( 50, 100, 200 or 300 μg of mRNA/ml with a small mRNA (1929b)), 用DLS检测的in vivo-jetRNA®+脂质体的大小。
通用性
in vivo jetRNA®+可以在任何动物模型(小鼠, 大鼠, 狗等)中递送多种类型的核酸(plasmid DNA, siRNA, shRNA等),且已有大量文献报道,其介导的mRNA递送通过腹腔注射后,可在多个器官中表达,特别是在脾脏和淋巴结中,也在其他器官(肺、胰腺和子宫等)中表达(见下图)。
mRNA递送到不同的器官的效果
(源于Polyplus)
编码荧光素酶的mRNA通过不同的给药途径(A /腹腔(IP)和B /肌内注射(IM)),使用in vivo jet RNA®+注射到小鼠体内,24小时后检测荧光素酶的表达。
安全性
in vivo-jetRNA®+显示了良好的耐受性和安全性。注射后基本无副作用,动物均保持健康,未出现疼痛反应。经不同途径进行mRNA/in vivo-jetRNA®复合物给药后,靶器官形态完好,未见组织损伤,且不会触发促炎细胞因子表达(见下图)。
安全性测试效果(源于Polyplus)
静脉注射编码荧光素酶的mRNA, 注射后2 到24小时抽血,使用ELISA或者MACSPlex kits 检测IL-6, IL-12, GM-CSF, IFN-gamma和TNF-alpha的水平,同时注射200ug LPS作为阳性对照。
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基因有限公司代理Polyplus转染试剂,提供适合用于病毒生产、蛋白/单抗生产、非病毒载体的体内转染及生命科学研究(各种核酸转染)四大产品线相关转染试剂。请在本文后留言或联系您身边的基因有限公司员工。