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高品质糖苷酶，助力糖生物学研究！

2023-08-02

随着糖生物学的迅速发展，蛋白质糖基化在制药和临床科学中的重要性日益增加，对用于聚糖分析的试剂质量要求也越来越高。目前许多现有的商品化糖苷酶在纯度方面存在明显不足，含有污染性糖苷酶副活性，这将使其在分析流程中的使用变得比较复杂和困难。

市售糖苷外切酶的污染活性检测比较

（源于NEB）

(A) 市售咖啡豆 α-半乳糖苷酶（CBG）中是否存在污染性 β-半乳糖苷酶活性。

(B) 市售肺炎链球菌 β-半乳糖苷酶（SPG）中是否存在污染性 α-神经氨酸苷酶活性。

其中，使用底物类似物 pNP-α-Neu5Ac 并没有观察到这种污染物，凸显了使用寡糖底物进行质量控制评估的重要性。缩写：Neu5Ac，N-乙酰神经氨酸；Gal，半乳糖；GlcNAc，N-乙酰葡糖胺；Glc，葡萄糖；AMC，7-氨基-4-甲基香豆素（荧光团）；pNP，对硝基苯基（发色团）。根据生产商的建议建立反应，在每个实验中，使用可以完全水解底物的酶作为对照反应，水解百分比（% hydrolysis）就是通过与对照反应比较计算得出。

NEB为糖生物学研究提供一系列高品质糖苷酶，其中许多酶都是重组酶。NEB 实施业内严格的质控和持续改进措施，使用 18 项独立的质量评估指标测试终产品（包括SDS-PAGE， ESI-TOF，使用天然碳水化合物底物代替合成的比色糖类似物等），以排除糖苷内切酶和糖苷外切酶活性污染，并确保糖苷酶纯度可达 ≥95% 。

PNGase F 是一种广谱特异性的酰胺酶，是从糖蛋白中去除 N-糖链最常用的酶。PNGase F 消化是大多数实验流程中关键的第一步，在生物制药行业中变得越来越重要。NEB提供多种形式的PNGase F，经严格质控评估，具有高纯度高重复性。

PNGase F 选择推荐表（源于NEB）

快速 PNGase F 是一种经过优化的快速去糖基化酶，可以将不同抗体或抗体融合表达的蛋白质完全去除N-连接糖。去糖基化过程无偏嗜性，产物可用于下游的层析或质谱分析。

💦 无偏嗜性地去除全部 N- 糖苷

💦 反应时间短，灵敏度高，重复性好

💦 可直接进入下游层析或者质谱分析

💦 重组蛋白，产品纯度 ≥ 95%，批间差小

抗体经快速 PNGase F 处理后的 ESI-TOF 分析结果（源于NEB）

抗体经快速 PNGase F（非还原剂型）处理后的 ESI-TOF 分析结果（源于NEB）

快速 PNGase F，让您实现在几分钟内完成去糖基化反应！

糖苷外切酶是非常有用的工具，但许多常用外切酶的商业来源通常缺乏供应链一致性，且整体产品质量差。NEB提供多种类型的高品质糖苷外切酶，经过多次严格质控，实现单位成本更低，纯度更高，批间差异更小，助力糖生物学研究！

常见的分析用糖苷外切酶（源于NEB）

R = 重组型, N = 野生型

将糖苷外切酶用于阐明聚糖结构已经过去 30 多年。随着时间的推移，有几种糖苷酶因其特异性更能满足分析需求，而成为该领域中聚糖测序的首选酶（见上表）。

糖苷酶的纯度和质量比较（源于NEB）

（A）通过 SDS-PAGE 分离后染色，比较常见的市售分析用糖苷酶。三个字母缩写对应的酶名称见表 1。空泳道是对 20 μL Sigma-Aldrich® NAN1 商品化储备液进行分离的结果，代表没有观察到任何蛋白质。（B）对来自 NEB 的商品化试剂进行 SDS-PAGE 分离，AMF、JBM 和 BTG 都是通过酵母系统重组表达的糖基化蛋白质。

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