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长达200Kbp核酸抽提试剂盒又可申请试用啦
酚:氯仿提取法、盐析法、核分离-琼脂糖包埋法或者通过使用各种硅胶膜试剂盒和磁珠法试剂来进行DNA提取,是目前三代测序客户常用的核酸纯化方法。 方法讨论 盐析法在提供高分子量DNA的同时,存在最重要的问题是纯度。由于缺乏柱膜纯化,提取出来的DNA往往有大量的污染物和抑制剂组份。盐析过程往往是冗长和耗时的。 酚:氯仿萃取物含有有毒试剂,需要特殊的废物处理。 硅胶膜和基于磁珠的纯化方法最重要的问题是DNA的完整性。离心力(硅胶膜提取方法)和频繁的吸液和混合(磁珠法)对DNA产生显著的剪切作用。因此,硅胶膜和磁珠纯化的DNA很少超过30 kbp,并且含有单链缺口,降低了HMW应用。 核分离-琼脂糖包埋法效果不错。但是这个提取方法对技术的要求比较高,还需要后期的大片段核酸回复系统,对于一般的实验者来说很难实现的。此外这个方法的过程也很繁琐,大约需要1-2天的时间来完成大片段的制备。 还有一种基于阴离子交换树脂技术的核酸纯化方法。 NucleoBond® HMW DNA kit 片段长,最长可达200Kbp 裂解液重力过柱,无需离心,减少了离心力对核酸的破碎作用,尽量保证核酸原生态,最长片段可达200kbp。 纯度高 采用了阴离子交换色谱技术,对核酸下游应用有抑制作用的组分均被清除,核酸纯度较高。 样本类型广 相比以往的核酸抽提产品,这款产品几乎通吃所有的样本类型,并且允许更大的上样量,比如300mg微生物样本(革兰氏阴性阳性菌、酵母)、1.5g植物组织、300mg动物组织、2ml血液、107细胞。 速度快 包括裂解的时间,整个提取过程2h。 总结 试剂盒纯化出的核酸满足长读长测序技术(如SMRT)和long‑range short‑read测序方法(如Linked-Reads数据的10X Genomics)。这款试剂盒也就成了基因组测序、基因组组装和基因簇克隆的选择。 应用数据 大片段 官方数据 DNA来自研磨方法匀浆的植物样本 Brassica sp.,使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。提取后的DNA在 Femto Pulse 系统上面分析。如图所示,在117218 bp检测到主峰,最长片段可达200000 bp。 客户demo结果: DNA来自植物样本黄褐棉样品,使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。如图所示,在164251 bp检测到主峰,最长片段可达200000 bp。 适用不同的样本类型并且得率和纯度较高 官方数据 除了核酸的完整性,纯度和得率对于HMW DNA测序的影响也非常大。NucleoBond® HMW DNA 试剂盒提取不同的样本,得率对于测序试验已足够, 吸光度比值A260/A280 > 1.75 和A260/A230 > 2.00,表明样本纯度也很高。 客户demo结果 DNA来自植物样本黄褐棉样品,使用NucleoBond® HMW DNA kit进行核酸纯化。 想试试这个NucleoBond® HMW DNA kit吗? 请扫描下方的二维码。 基因有限公司作为MACHEREY-NAGEL的全国一级代理,可为您提供针对不同类型样本,例如血液、组织细胞、植物、真菌、土壤、粪便等的DNA和RNA核酸抽提解决方案。详细产品资料可留言或联系身边基因人。