影响PCR实验结果的因素有很多，通常可以分为以下几种：

• 引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度；

• 酶及其浓度；

• dNTP的质量及浓度；

• 模板核酸质量；

• Mg²⁺浓度；

• 温度与时间的设置；

• 循环次数；

• 设备，耗材等。
  

在以上众多影响因素中，耗材是一个非常重要，但也最易被忽视的因素之一。

PCR耗材类型众多：八连管、低容管、标准管、无裙边、半裙边，全裙边等一系列的PCR及qPCR板，选择起来非常困难。那这其中是否有一些共性问题，又该如何选择呢？

答：PCR/qPCR耗材一般都是聚丙烯（PP）材质，因其为生物学惰性材料，表面不易于粘附生物分子，且有着良好的化学耐性及无温度耐受性（可耐受121℃高温高压灭菌，也可以承受热循环过程中的温度变化）。这些材料通常会与试剂或者样品直接接触，因而在生产制备过程中需要选用高质量的材料和良好的加工工艺。

答：PCR管的体积大多数都可以满足PCR反应要求。但是在满足实验要求的基础上，优先推荐选用低容管。因为低容反应管/板有些较小的上方空间，可提高热传导率并降低蒸发。而且在加样时，需要避免加样过量或过少。加样过量会导致热传导率下降，液体溢出及交叉污染，而加样量过少则可能会造成样品蒸发损失。大家可依据具体的实验要求选用合适的产品。

常见的反应管规格及体积：

单管/八连管：0.5ml、0.2ml、0.1ml

96孔板：0.2ml、0.1ml

384孔板：0.04ml

答：当样品量较少时，都会优先选用单管或连管。但是当反应体积需求较大时，单管可达到0.5ml。平盖和凸盖各有各的优点，可参考下面的信息。

答：对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管则更有助于进行样品分类管理。

但qPCR更推荐选用优质的白色PCR耗材。

由于qPCR需要定时定量检测荧光信号强度，更需要灵敏、精确的荧光信号传递。与传统的透明PCR产品相比，白色PCR产品可最大程度的反射荧光信号，减少孔间信号交叉污染，可优化实时荧光定量PCR的结果。

答：一般分为无裙边、半裙边，全群边几种。

无裙边板：可适用于大多数的PCR仪或qPCR仪，但不适用于自动化应用，因为移液过程中稳定性不高，需要配合板托使用。

半裙边板：可适配标签或应用条码及自动化应用，有着较好的移液稳定性。

全裙边板：非常适用于自动化实验应用，也可适配标签及应用条码。机械强度较好，可适用于凸出模块的PCR仪，且移液过程中稳定性高。

答：

切角：PCR板的切角位置选择取决于适配仪器要求，便于定位。

标识：PCR板的数字字母标记有助于识别单个孔及样品位置。一般为凸出的颜色数字标识或者印刻标识。对于一些自动化应用实验，印刻标记的反应板密封性会更好。

答：常见的PCR板有平孔缘和加高孔缘两种。

平孔缘的反应板，可适用于大多数的PCR仪。

升孔缘的反应板，可降低样品间的交叉污染风险。

答：根据具体的PCR实验要求选用适配的高质量封板膜，不仅有效保护样品，防止污染，还可提供可信赖的实验检测数据。

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