传统多重荧光免疫组化是指基于酪胺信号放大（TSA）技术，可实现在同一组织切片上多个靶标蛋白共同染色，通过荧光图像分析挖掘组织微环境中的复杂信息。

虽然TSA技术可以实现多个靶标蛋白共同染色，但是同时TSA技术却也存在着很多弊端：

• 耗时的优化过程；

  测试的每种抗体都需要进行滴定，

  抗体的顺序需要优化，

• 每次更换Panel时，都需要重新优化；

• 方案耗时，每种抗体单独添加，通常需孵育过夜；

• 多轮抗体孵育，可能造成表位丢失和组织降解；

• 酪氨酸沉积：抗原表位附近的酪氨酸可能耗尽，已经结合的TSA也可能抑制后一轮染色的信号沉积

针对TSA技术的上述弊端，Cell Signaling Technology（CST） SignalStar提供了很好的解决方案：

SignalStar检测的优势:

• 优化过的实验方案 - 开箱即用；

  试剂和方案已经过优化，可与我们的抗体配合使用，我们的抗体可以按任何顺序使用，

• 构建新Panel时无需重新优化 - 开箱即用；

• 所有抗体一次性添加，2 天内仅需 6 小时即可进行 8 重染色；

• 无需多轮抗体孵育！温和去除前一轮染色结合的荧光寡核苷酸，进行后一轮成像；

• 不是沉积检测 - 荧光寡核苷酸不会导致空间拥挤或表位遮蔽。

SignalStar^TM Multiplex IHC试剂盒

1. 将CST寡核苷酸偶联的抗体加入到经过脱蜡，复水以及抗原修复处理的FFPE组织中
   

2. 一次添加所有抗体，然后进行温和固定

3. 互补寡核苷酸与前4个抗体的偶联标签杂交

4. 使用荧光寡核苷酸产生并放大信号(AF488, AF594, AF647, AF750)

5. 寡核苷酸连接

6. 寡核苷酸特异性酶去除所有荧光信号

7. 互补寡核苷酸与偶联抗体上的寡核苷酸标签进行第二轮杂交

8. 使用荧光寡核苷酸产生并放大信号(AF488, AF594, AF647, AF750)

9. 寡核苷酸连接

SignalStar^TM 验证数据

基因有限公司作为Cell Signaling Technology (CST) 优质一级代理商，为您实验提供更优的支持和帮助。